军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2013年
2期
118-121,125
,共5页
闫小娟%张义全%王丽%刘梦颖%杨世亚%杨瑞馥%周冬生%邱景富
閆小娟%張義全%王麗%劉夢穎%楊世亞%楊瑞馥%週鼕生%邱景富
염소연%장의전%왕려%류몽영%양세아%양서복%주동생%구경부
副溶血弧菌%生物膜%Western印迹
副溶血弧菌%生物膜%Western印跡
부용혈호균%생물막%Western인적
目的 建立副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的Western印迹方法.方法 将VPA1405基因克隆到pET-28a(+)载体,转入大肠杆菌BL21中进行不可溶性表达,在变性条件下纯化得到VPA1405蛋白,制备的包涵体溶液直接免疫兔得到多克隆抗体,进而利用Western印迹检测VPA1405蛋白在野生株(WT)和opaR基因敲除株(△opaR)中表达水平的差异.结果 成功表达纯化了6个与生物膜相关基因的蛋白；Western印迹结果显示OpaR调控子对VPA1405基因的表达呈正调控,这与表型实验结果相符.结论 成功建立了VP的Western印迹实验平台,该平台可用于后续VP生物膜相关基因的调控研究.
目的 建立副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的Western印跡方法.方法 將VPA1405基因剋隆到pET-28a(+)載體,轉入大腸桿菌BL21中進行不可溶性錶達,在變性條件下純化得到VPA1405蛋白,製備的包涵體溶液直接免疫兔得到多剋隆抗體,進而利用Western印跡檢測VPA1405蛋白在野生株(WT)和opaR基因敲除株(△opaR)中錶達水平的差異.結果 成功錶達純化瞭6箇與生物膜相關基因的蛋白；Western印跡結果顯示OpaR調控子對VPA1405基因的錶達呈正調控,這與錶型實驗結果相符.結論 成功建立瞭VP的Western印跡實驗平檯,該平檯可用于後續VP生物膜相關基因的調控研究.
목적 건립부용혈호균(Vibrio parahaemolyticus,VP)적Western인적방법.방법 장VPA1405기인극륭도pET-28a(+)재체,전입대장간균BL21중진행불가용성표체,재변성조건하순화득도VPA1405단백,제비적포함체용액직접면역토득도다극륭항체,진이이용Western인적검측VPA1405단백재야생주(WT)화opaR기인고제주(△opaR)중표체수평적차이.결과 성공표체순화료6개여생물막상관기인적단백；Western인적결과현시OpaR조공자대VPA1405기인적표체정정조공,저여표형실험결과상부.결론 성공건립료VP적Western인적실험평태,해평태가용우후속VP생물막상관기인적조공연구.
