分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2013年
2期
199-204
,共6页
沙莎%殷赟%高晓莲%黄庄荣%余挺%郑晓冬
沙莎%慇赟%高曉蓮%黃莊榮%餘挺%鄭曉鼕
사사%은빈%고효련%황장영%여정%정효동
免疫芯片%抗体固定%抗体-寡核苷酸复合物%核酸杂交
免疫芯片%抗體固定%抗體-寡覈苷痠複閤物%覈痠雜交
면역심편%항체고정%항체-과핵감산복합물%핵산잡교
基于核酸分子杂交原理构建了一种新型抗体固定方法.先将抗体与寡核苷酸单链交联,再将两者的复合物与固相载体表面上的互补寡核苷酸链结合,从而将抗体固定到载体的表面.在磁珠表面对该固定方法进行实验,证明了方法的可行性.以本方法构建了针对转基因Bt Cry1Ac蛋白的免疫芯片,用Cy3标记二抗对其探针固定效果进行分析,并且在芯片上对Bt Cry1 Ac蛋白进行梯度浓度检测试验.结果表明,以本方法构建的抗体芯片,探针分布具有良好的特异性;探针层分布均匀,非特异吸附小;检测灵敏度达到0.01 ~ 0.05 μg/L;此外,通过杂交核酸双链的解离成功实现了芯片的再生,有助于解决传统抗体固定方法中芯片不可再生的问题.
基于覈痠分子雜交原理構建瞭一種新型抗體固定方法.先將抗體與寡覈苷痠單鏈交聯,再將兩者的複閤物與固相載體錶麵上的互補寡覈苷痠鏈結閤,從而將抗體固定到載體的錶麵.在磁珠錶麵對該固定方法進行實驗,證明瞭方法的可行性.以本方法構建瞭針對轉基因Bt Cry1Ac蛋白的免疫芯片,用Cy3標記二抗對其探針固定效果進行分析,併且在芯片上對Bt Cry1 Ac蛋白進行梯度濃度檢測試驗.結果錶明,以本方法構建的抗體芯片,探針分佈具有良好的特異性;探針層分佈均勻,非特異吸附小;檢測靈敏度達到0.01 ~ 0.05 μg/L;此外,通過雜交覈痠雙鏈的解離成功實現瞭芯片的再生,有助于解決傳統抗體固定方法中芯片不可再生的問題.
기우핵산분자잡교원리구건료일충신형항체고정방법.선장항체여과핵감산단련교련,재장량자적복합물여고상재체표면상적호보과핵감산련결합,종이장항체고정도재체적표면.재자주표면대해고정방법진행실험,증명료방법적가행성.이본방법구건료침대전기인Bt Cry1Ac단백적면역심편,용Cy3표기이항대기탐침고정효과진행분석,병차재심편상대Bt Cry1 Ac단백진행제도농도검측시험.결과표명,이본방법구건적항체심편,탐침분포구유량호적특이성;탐침층분포균균,비특이흡부소;검측령민도체도0.01 ~ 0.05 μg/L;차외,통과잡교핵산쌍련적해리성공실현료심편적재생,유조우해결전통항체고정방법중심편불가재생적문제.