畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
3期
81-84
,共4页
夏晓辉%丁晓双%张晓轩%张守发%许应天
夏曉輝%丁曉雙%張曉軒%張守髮%許應天
하효휘%정효쌍%장효헌%장수발%허응천
犬附红细胞体%16S rRNA%PCR
犬附紅細胞體%16S rRNA%PCR
견부홍세포체%16S rRNA%PCR
通过将GenBank上报道的犬附红细胞体16S rRNA基因序列与其他物种同源序列进行比对,取其种间特异性和种内保守性较高区域设计1对引物,以吉林省延边地区犬附红细胞体基因组DNA为模板进行PCR扩增,并进行特异性、敏感性试验验证,建立犬附红细胞体PCR诊断方法,应用于临床检测.结果表明:该方法可成功扩增出大小为529 bp的犬附红细胞体片段,与GenBank中German no.1(AY150973.1)序列同源性为98.5％.其最低DNA检测量为25 fg/μL,不与犬巴贝斯虫、犬弓形虫及猪附红细胞体等病原体基因组产生交叉反应.同时通过对57份犬血液样本的检测结果说明,该方法检出率明显高于姬姆萨染色镜检法,且避免了假阳性.本试验所建立的PCR检测方法具有特异、敏感、准确等优点,为犬附红细胞体病的诊断提供了一种可靠的方法.
通過將GenBank上報道的犬附紅細胞體16S rRNA基因序列與其他物種同源序列進行比對,取其種間特異性和種內保守性較高區域設計1對引物,以吉林省延邊地區犬附紅細胞體基因組DNA為模闆進行PCR擴增,併進行特異性、敏感性試驗驗證,建立犬附紅細胞體PCR診斷方法,應用于臨床檢測.結果錶明:該方法可成功擴增齣大小為529 bp的犬附紅細胞體片段,與GenBank中German no.1(AY150973.1)序列同源性為98.5％.其最低DNA檢測量為25 fg/μL,不與犬巴貝斯蟲、犬弓形蟲及豬附紅細胞體等病原體基因組產生交扠反應.同時通過對57份犬血液樣本的檢測結果說明,該方法檢齣率明顯高于姬姆薩染色鏡檢法,且避免瞭假暘性.本試驗所建立的PCR檢測方法具有特異、敏感、準確等優點,為犬附紅細胞體病的診斷提供瞭一種可靠的方法.
통과장GenBank상보도적견부홍세포체16S rRNA기인서렬여기타물충동원서렬진행비대,취기충간특이성화충내보수성교고구역설계1대인물,이길림성연변지구견부홍세포체기인조DNA위모판진행PCR확증,병진행특이성、민감성시험험증,건립견부홍세포체PCR진단방법,응용우림상검측.결과표명:해방법가성공확증출대소위529 bp적견부홍세포체편단,여GenBank중German no.1(AY150973.1)서렬동원성위98.5％.기최저DNA검측량위25 fg/μL,불여견파패사충、견궁형충급저부홍세포체등병원체기인조산생교차반응.동시통과대57빈견혈액양본적검측결과설명,해방법검출솔명현고우희모살염색경검법,차피면료가양성.본시험소건립적PCR검측방법구유특이、민감、준학등우점,위견부홍세포체병적진단제공료일충가고적방법.
