分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2013年
6期
838-842
,共5页
吴春燕%陈赫楠%李静%宋廷宇
吳春燕%陳赫楠%李靜%宋廷宇
오춘연%진혁남%리정%송정우
胡萝卜%正交设计%ISSR%PCR反应体系
鬍蘿蔔%正交設計%ISSR%PCR反應體繫
호라복%정교설계%ISSR%PCR반응체계
Carrot%Orthogonal design%ISSR%PCR reaction system
为获得适于胡萝卜ISSR-PCR的反应体系，本研究以胡萝卜为试验材料，采用新型植物基因组DNA提取试剂盒提取胡萝卜嫩叶DNA，利用正交试验设计方法，对ISSR-PCR的5个影响因素：Mg2+、dNTP、Taq DNA聚合酶、引物和模板DNA进行了研究。结果得到胡萝卜ISSR-PCR的最佳反应体系：25μL的反应体系中含有1.5 mmol/L Mg2+、0.15 mmol/L dNTP、1.5 U Taq DNA聚合酶、0.2μmol/L引物、50 ng模板DNA。利用优化的反应体系，对最佳反应次数进行了筛选，结果表明优化的反应体系适宜的循环次数是35次。该体系可以为胡萝卜遗传多样性分析、基因定位等提供理论依据。
為穫得適于鬍蘿蔔ISSR-PCR的反應體繫，本研究以鬍蘿蔔為試驗材料，採用新型植物基因組DNA提取試劑盒提取鬍蘿蔔嫩葉DNA，利用正交試驗設計方法，對ISSR-PCR的5箇影響因素：Mg2+、dNTP、Taq DNA聚閤酶、引物和模闆DNA進行瞭研究。結果得到鬍蘿蔔ISSR-PCR的最佳反應體繫：25μL的反應體繫中含有1.5 mmol/L Mg2+、0.15 mmol/L dNTP、1.5 U Taq DNA聚閤酶、0.2μmol/L引物、50 ng模闆DNA。利用優化的反應體繫，對最佳反應次數進行瞭篩選，結果錶明優化的反應體繫適宜的循環次數是35次。該體繫可以為鬍蘿蔔遺傳多樣性分析、基因定位等提供理論依據。
위획득괄우호라복ISSR-PCR적반응체계，본연구이호라복위시험재료，채용신형식물기인조DNA제취시제합제취호라복눈협DNA，이용정교시험설계방법，대ISSR-PCR적5개영향인소：Mg2+、dNTP、Taq DNA취합매、인물화모판DNA진행료연구。결과득도호라복ISSR-PCR적최가반응체계：25μL적반응체계중함유1.5 mmol/L Mg2+、0.15 mmol/L dNTP、1.5 U Taq DNA취합매、0.2μmol/L인물、50 ng모판DNA。이용우화적반응체계，대최가반응차수진행료사선，결과표명우화적반응체계괄의적순배차수시35차。해체계가이위호라복유전다양성분석、기인정위등제공이론의거。
To obtain the optimum ISSR-PCR reaction system of carrot, the carrot genomic DNA was extracted from young leaf using new plant genomic DNA extraction kit. And five factors, including Mg2+, dNTP, Taq DNA polymerase, primers and template DNA were researched to establish the optimum reaction system by orthogonal design, that is 25μL of PCR reaction mixture containing 1.5 mmol/L Mg2+, 0.15 mmol/L dNTP, 1.5 U Taq DNA polymerase, 0.2 μmol/L primers and 50 ng template DNA. Then the best reaction times were screened by the optimum reaction system. The results showed that the best cycle number was 35. This system could provide theoretical foundation for carrot research on genetic diversity analysis, gene location, etc..
