动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2014年
4期
15-18
,共4页
杨震%左玉柱%裴丽华%范京惠
楊震%左玉柱%裴麗華%範京惠
양진%좌옥주%배려화%범경혜
猪氨基肽酶%真核表达%猪流行性腹泻病毒%Vero细胞系
豬氨基肽酶%真覈錶達%豬流行性腹瀉病毒%Vero細胞繫
저안기태매%진핵표체%저류행성복사병독%Vero세포계
为了构建能够表达猪pAPN-SPC段的真核细胞表达载体pEGFP-N1-pAPN-SPC,并在Vero细胞中进行表达,本试验从猪肠道黏膜组织基因组中扩增出pAPN-SPC段基因,插到带有EGFP基因的真核细胞表达载体pEGFP-N1中,经Bam H I及EcoR工酶切鉴定正确后转染Vero细胞,用荧光显微镜检测细胞中EGFP的表达,用RT-PCR和Western blot检测pAPN-SPC段基因的表达情况.结果成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-pAPN-SPC,且pAPN-SPC段在Vero细胞中得到了有效表达,为研究pAPN-SPC段蛋白对病毒增殖效果的影响奠定了基础.
為瞭構建能夠錶達豬pAPN-SPC段的真覈細胞錶達載體pEGFP-N1-pAPN-SPC,併在Vero細胞中進行錶達,本試驗從豬腸道黏膜組織基因組中擴增齣pAPN-SPC段基因,插到帶有EGFP基因的真覈細胞錶達載體pEGFP-N1中,經Bam H I及EcoR工酶切鑒定正確後轉染Vero細胞,用熒光顯微鏡檢測細胞中EGFP的錶達,用RT-PCR和Western blot檢測pAPN-SPC段基因的錶達情況.結果成功構建瞭真覈錶達載體pEGFP-N1-pAPN-SPC,且pAPN-SPC段在Vero細胞中得到瞭有效錶達,為研究pAPN-SPC段蛋白對病毒增殖效果的影響奠定瞭基礎.
위료구건능구표체저pAPN-SPC단적진핵세포표체재체pEGFP-N1-pAPN-SPC,병재Vero세포중진행표체,본시험종저장도점막조직기인조중확증출pAPN-SPC단기인,삽도대유EGFP기인적진핵세포표체재체pEGFP-N1중,경Bam H I급EcoR공매절감정정학후전염Vero세포,용형광현미경검측세포중EGFP적표체,용RT-PCR화Western blot검측pAPN-SPC단기인적표체정황.결과성공구건료진핵표체재체pEGFP-N1-pAPN-SPC,차pAPN-SPC단재Vero세포중득도료유효표체,위연구pAPN-SPC단단백대병독증식효과적영향전정료기출.
