青岛大学学报（工程技术版）
青島大學學報（工程技術版）
청도대학학보（공정기술판）
JOURNAL OF QINGDAO UNIVERSITY(ENGINEERING & TECHNOLOGY EDITION)
2014年
2期
89-93
,共5页
杨晓%宋修明%王艳士%李荣贵
楊曉%宋脩明%王豔士%李榮貴
양효%송수명%왕염사%리영귀
黑松%银松素合成酶%cDNA%克隆%表达
黑鬆%銀鬆素閤成酶%cDNA%剋隆%錶達
흑송%은송소합성매%cDNA%극륭%표체
pinosylvin synthase%pinus thunbergii%cDNA%cloning%expression
松萎蔫病是由松材线虫引起的一种危害性极大的森林病害,为研究黑松对松材线虫的抗性机制,本文利用RT-PCR技术对黑松体内经转录组分析获得的与银松素合成酶mRNA高相似度的序列进行扩增,获得了银松素合成酶cDNA,然后将此银松素合成酶基因(PSL)克隆到表达载体pET-15b上,构建了重组表达质粒pET-15b-PSL,将其转化大肠杆菌BL21 (DE3)后构建工程菌,通过IPTG诱导,工程菌高效表达重组蛋白,经Ni2+螯合柱亲和层析得到了纯化重组银松素合成酶.该研究为了解黑松银松素合成酶的功能及松萎蔫病抗性松树的培育奠定了基础.
鬆萎蔫病是由鬆材線蟲引起的一種危害性極大的森林病害,為研究黑鬆對鬆材線蟲的抗性機製,本文利用RT-PCR技術對黑鬆體內經轉錄組分析穫得的與銀鬆素閤成酶mRNA高相似度的序列進行擴增,穫得瞭銀鬆素閤成酶cDNA,然後將此銀鬆素閤成酶基因(PSL)剋隆到錶達載體pET-15b上,構建瞭重組錶達質粒pET-15b-PSL,將其轉化大腸桿菌BL21 (DE3)後構建工程菌,通過IPTG誘導,工程菌高效錶達重組蛋白,經Ni2+螯閤柱親和層析得到瞭純化重組銀鬆素閤成酶.該研究為瞭解黑鬆銀鬆素閤成酶的功能及鬆萎蔫病抗性鬆樹的培育奠定瞭基礎.
송위언병시유송재선충인기적일충위해성겁대적삼림병해,위연구흑송대송재선충적항성궤제,본문이용RT-PCR기술대흑송체내경전록조분석획득적여은송소합성매mRNA고상사도적서렬진행확증,획득료은송소합성매cDNA,연후장차은송소합성매기인(PSL)극륭도표체재체pET-15b상,구건료중조표체질립pET-15b-PSL,장기전화대장간균BL21 (DE3)후구건공정균,통과IPTG유도,공정균고효표체중조단백,경Ni2+오합주친화층석득도료순화중조은송소합성매.해연구위료해흑송은송소합성매적공능급송위언병항성송수적배육전정료기출.
