CAJ | 학술논문

玉米胚乳是籽粒淀粉形成的主要场所,胚乳细胞的发育对籽粒的器官建成具有重要意义.分离胚乳细胞原生质体,能为胚乳培养、转录组分析等后续研究提供均一实验材料.本文在借鉴前人研究的基础上,通过调整酶的搭配种类、浓度以及质膜稳定剂、渗透压稳定剂的使用,优化了一套有效的玉米籽粒胚乳原生质体分离方法,并进一步运用流式分选技术纯化原生质体.结果表明,以1％纤维素酶、0.5％离析酶、0.5％半纤维素酶,在渗透压调节剂0.7～0.8 mol L-1和质膜稳定剂0.8 mol L-1的MS培养液内,30℃消解4h,能够获得大量完整的粗制原生质体,二乙酸荧光素(FDA)染色表明纯化的原生质体仍能保持90％以上的生活力.流式分选术可将有活力原生质体从粗制原生质体悬浮液中富集、纯化出来.对一些原生质体分离和流式分选时的技术参数和影响因素进行了讨论.
옥미배유시자립정분형성적주요장소,배유세포적발육대자립적기관건성구유중요의의.분리배유세포원생질체,능위배유배양、전록조분석등후속연구제공균일실험재료.본문재차감전인연구적기출상,통과조정매적탑배충류、농도이급질막은정제、삼투압은정제적사용,우화료일투유효적옥미자립배유원생질체분리방법,병진일보운용류식분선기술순화원생질체.결과표명,이1％섬유소매、0.5％리석매、0.5％반섬유소매,재삼투압조절제0.7～0.8 mol L-1화질막은정제0.8 mol L-1적MS배양액내,30℃소해4h,능구획득대량완정적조제원생질체,이을산형광소(FDA)염색표명순화적원생질체잉능보지90％이상적생활력.류식분선술가장유활력원생질체종조제원생질체현부액중부집、순화출래.대일사원생질체분리화류식분선시적기술삼수화영향인소진행료토론.