长江大学学报(自科版)石油农学中旬刊
長江大學學報(自科版)石油農學中旬刊
장강대학학보(자과판)석유농학중순간
Journal of Yangtze University (Natural Science Edition)
2014年
8期
38-41
,共4页
汪招雄%康银峰%孙敏华%高诗敏%谢鹏%任涛
汪招雄%康銀峰%孫敏華%高詩敏%謝鵬%任濤
왕초웅%강은봉%손민화%고시민%사붕%임도
新城疫病毒%V基因%W基因%真核表达%细胞凋亡
新城疫病毒%V基因%W基因%真覈錶達%細胞凋亡
신성역병독%V기인%W기인%진핵표체%세포조망
将含新城疫病毒(NDV)疫苗株LaSota和强毒株GM V和W基因的真核表达质粒pEGFP-La V、pEGFP-La W、pEGFP-GM V和pEGFP-GM W转染鸡胚成纤维细胞(DF-1)。转染24h后,用荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白GFP在细胞中显著表达。分别于转染后24、36h和48h用流式细胞仪测定表达产物对DF-1细胞凋亡的影响。结果表明,随着转染时间的增加,细胞早期凋亡率逐渐上升。在质粒转染后24h , pEGFP-GM V、pEGFP-GM W、pEGFP-La V和pEGFP-La W真核表达产物诱导DF-1细胞的凋亡率在14 T.26%~17.09%之间,差异不大,但都明显高于空载体组。而在质粒转染后36h ,pEGFP-GM V、pEGFP-GM W真核表达产物诱导细胞凋亡率分别为45.05%和43.4%,明显高于pEGFP-La V 和pEG-FP-La W诱导的31.44%和38.64%的凋亡率。在质粒转染后48h ,pEGFP-GM W和pEGFP-La W真核表达产物诱导细胞凋亡率均超过50%, pEGFP-GM W 真核表达产物诱导细胞凋亡率达到了43.4%,而pEGFP-La V真核表达产物诱导细胞凋亡率最低,为33.44%。由此表明,来源于不同毒力 NDV毒株非结构蛋白V和W均能诱导早期细胞凋亡,但是诱导细胞凋亡能力存在一定的差异。
將含新城疫病毒(NDV)疫苗株LaSota和彊毒株GM V和W基因的真覈錶達質粒pEGFP-La V、pEGFP-La W、pEGFP-GM V和pEGFP-GM W轉染鷄胚成纖維細胞(DF-1)。轉染24h後,用熒光顯微鏡觀察到綠色熒光蛋白GFP在細胞中顯著錶達。分彆于轉染後24、36h和48h用流式細胞儀測定錶達產物對DF-1細胞凋亡的影響。結果錶明,隨著轉染時間的增加,細胞早期凋亡率逐漸上升。在質粒轉染後24h , pEGFP-GM V、pEGFP-GM W、pEGFP-La V和pEGFP-La W真覈錶達產物誘導DF-1細胞的凋亡率在14 T.26%~17.09%之間,差異不大,但都明顯高于空載體組。而在質粒轉染後36h ,pEGFP-GM V、pEGFP-GM W真覈錶達產物誘導細胞凋亡率分彆為45.05%和43.4%,明顯高于pEGFP-La V 和pEG-FP-La W誘導的31.44%和38.64%的凋亡率。在質粒轉染後48h ,pEGFP-GM W和pEGFP-La W真覈錶達產物誘導細胞凋亡率均超過50%, pEGFP-GM W 真覈錶達產物誘導細胞凋亡率達到瞭43.4%,而pEGFP-La V真覈錶達產物誘導細胞凋亡率最低,為33.44%。由此錶明,來源于不同毒力 NDV毒株非結構蛋白V和W均能誘導早期細胞凋亡,但是誘導細胞凋亡能力存在一定的差異。
장함신성역병독(NDV)역묘주LaSota화강독주GM V화W기인적진핵표체질립pEGFP-La V、pEGFP-La W、pEGFP-GM V화pEGFP-GM W전염계배성섬유세포(DF-1)。전염24h후,용형광현미경관찰도록색형광단백GFP재세포중현저표체。분별우전염후24、36h화48h용류식세포의측정표체산물대DF-1세포조망적영향。결과표명,수착전염시간적증가,세포조기조망솔축점상승。재질립전염후24h , pEGFP-GM V、pEGFP-GM W、pEGFP-La V화pEGFP-La W진핵표체산물유도DF-1세포적조망솔재14 T.26%~17.09%지간,차이불대,단도명현고우공재체조。이재질립전염후36h ,pEGFP-GM V、pEGFP-GM W진핵표체산물유도세포조망솔분별위45.05%화43.4%,명현고우pEGFP-La V 화pEG-FP-La W유도적31.44%화38.64%적조망솔。재질립전염후48h ,pEGFP-GM W화pEGFP-La W진핵표체산물유도세포조망솔균초과50%, pEGFP-GM W 진핵표체산물유도세포조망솔체도료43.4%,이pEGFP-La V진핵표체산물유도세포조망솔최저,위33.44%。유차표명,래원우불동독력 NDV독주비결구단백V화W균능유도조기세포조망,단시유도세포조망능력존재일정적차이。