林业科学研究
林業科學研究
임업과학연구
FOREST RESEARCH
2013年
5期
542-547
,共6页
饶国栋%张永卓%魏弘宜%蒋湘宁%陆海%张建国
饒國棟%張永卓%魏弘宜%蔣湘寧%陸海%張建國
요국동%장영탁%위홍의%장상저%륙해%장건국
4-香豆酸%辅酶A连接酶%HPLC-MS%原核表达%毛白杨
4-香豆痠%輔酶A連接酶%HPLC-MS%原覈錶達%毛白楊
4-향두산%보매A련접매%HPLC-MS%원핵표체%모백양
4CL%HPLC-MS%prokaryotic expression%Populus tomentosa
为了进一步研究杨树4CL基因,以毛白杨为材料克隆到一个新的毛白杨4CL3基因.生物信息学分析结果显示:该基因和其他4CL基因一样含有4CL基因家族2个保守框Box Ⅰ和Box Ⅱ.将4CL3基因连接至原核表达载体pQE30,表达纯化后测定其蛋白的比活力,结果显示:4CL3基因对不同底物表现出了不同的催化效率.对该基因的最适温度和最适pH值测定后发现:4CL蛋白的最适温度为40℃,最适pH值为8.5,且在pH =9.0时有60％的活力.采用HPLC-MS的方法,分析了4CL3蛋白对混合底物的催化情况,结果显示:在混合底物下,4CL3蛋白对4-香豆酸、阿魏酸和肉桂酸都表现较高的活力,而对芥子酸和咖啡酸没有活力.
為瞭進一步研究楊樹4CL基因,以毛白楊為材料剋隆到一箇新的毛白楊4CL3基因.生物信息學分析結果顯示:該基因和其他4CL基因一樣含有4CL基因傢族2箇保守框Box Ⅰ和Box Ⅱ.將4CL3基因連接至原覈錶達載體pQE30,錶達純化後測定其蛋白的比活力,結果顯示:4CL3基因對不同底物錶現齣瞭不同的催化效率.對該基因的最適溫度和最適pH值測定後髮現:4CL蛋白的最適溫度為40℃,最適pH值為8.5,且在pH =9.0時有60％的活力.採用HPLC-MS的方法,分析瞭4CL3蛋白對混閤底物的催化情況,結果顯示:在混閤底物下,4CL3蛋白對4-香豆痠、阿魏痠和肉桂痠都錶現較高的活力,而對芥子痠和咖啡痠沒有活力.
위료진일보연구양수4CL기인,이모백양위재료극륭도일개신적모백양4CL3기인.생물신식학분석결과현시:해기인화기타4CL기인일양함유4CL기인가족2개보수광Box Ⅰ화Box Ⅱ.장4CL3기인련접지원핵표체재체pQE30,표체순화후측정기단백적비활력,결과현시:4CL3기인대불동저물표현출료불동적최화효솔.대해기인적최괄온도화최괄pH치측정후발현:4CL단백적최괄온도위40℃,최괄pH치위8.5,차재pH =9.0시유60％적활력.채용HPLC-MS적방법,분석료4CL3단백대혼합저물적최화정황,결과현시:재혼합저물하,4CL3단백대4-향두산、아위산화육계산도표현교고적활력,이대개자산화가배산몰유활력.
