实验动物科学
實驗動物科學
실험동물과학
LABORATORY ANIMAL SCIENCE
2014年
2期
7-12
,共6页
殷黎静%杨伟伟%殷筱舒%顾小丽%张艳丽%李高天%郑经纬%吴宝金
慇黎靜%楊偉偉%慇篠舒%顧小麗%張豔麗%李高天%鄭經緯%吳寶金
은려정%양위위%은소서%고소려%장염려%리고천%정경위%오보금
Vill基因%pEF6/V5His-Vill%显微注射%转基因小鼠
Vill基因%pEF6/V5His-Vill%顯微註射%轉基因小鼠
Vill기인%pEF6/V5His-Vill%현미주사%전기인소서
Vill gene%pEF6V5His-Vill%microinjection%transgenic mouse
目的 通过制备Vill转基因小鼠研究该基因的功能.方法与结果 首先由RT-PCR方法获得全长约2 605 bp的Vill基因;经T载体克隆测序验证后,以克隆载体pMD19-T-Vill为模板,设计引物并引入酶切位点,将PCR扩增产物与pEF6/V5-His-LacZ同时进行酶切、连接,构建表达载体pEF6/V5 His-Vill;经真核表达验证后,酶切获得含Vill基因的显微注射DNA构件;显微注射390枚受精卵后,在出生存活的77只仔鼠中获得转基因阳性G0代小鼠19只,其中16只能够稳定遗传并建系,转基因阳性小鼠外观未有明显改变.结论 Vill转基因小鼠为该基因的功能研究准备了实验材料.
目的 通過製備Vill轉基因小鼠研究該基因的功能.方法與結果 首先由RT-PCR方法穫得全長約2 605 bp的Vill基因;經T載體剋隆測序驗證後,以剋隆載體pMD19-T-Vill為模闆,設計引物併引入酶切位點,將PCR擴增產物與pEF6/V5-His-LacZ同時進行酶切、連接,構建錶達載體pEF6/V5 His-Vill;經真覈錶達驗證後,酶切穫得含Vill基因的顯微註射DNA構件;顯微註射390枚受精卵後,在齣生存活的77隻仔鼠中穫得轉基因暘性G0代小鼠19隻,其中16隻能夠穩定遺傳併建繫,轉基因暘性小鼠外觀未有明顯改變.結論 Vill轉基因小鼠為該基因的功能研究準備瞭實驗材料.
목적 통과제비Vill전기인소서연구해기인적공능.방법여결과 수선유RT-PCR방법획득전장약2 605 bp적Vill기인;경T재체극륭측서험증후,이극륭재체pMD19-T-Vill위모판,설계인물병인입매절위점,장PCR확증산물여pEF6/V5-His-LacZ동시진행매절、련접,구건표체재체pEF6/V5 His-Vill;경진핵표체험증후,매절획득함Vill기인적현미주사DNA구건;현미주사390매수정란후,재출생존활적77지자서중획득전기인양성G0대소서19지,기중16지능구은정유전병건계,전기인양성소서외관미유명현개변.결론 Vill전기인소서위해기인적공능연구준비료실험재료.
