林业科学研究
林業科學研究
임업과학연구
FOREST RESEARCH
2013年
5期
578-587
,共10页
蒋瑶%戚晓利%赵树堂%卢孟柱
蔣瑤%慼曉利%趙樹堂%盧孟柱
장요%척효리%조수당%로맹주
启动子%APETALA1%CArG box%分生组织%形态建成%GUS染色
啟動子%APETALA1%CArG box%分生組織%形態建成%GUS染色
계동자%APETALA1%CArG box%분생조직%형태건성%GUS염색
promoter%APETALA1%CArG box%meristem%plant morphogenesis%GUS staining
为了分析AP1的表达调控模式,本研究克隆了拟南芥花异常株系AFDL的AP1启动子,启动子元件预测结果表明:AP1启动子中含有3个结合MADS调控因子的CArG box(从5'依次编号为CArG1、CArG2、CArG3),通过删减AP1启动子长度以及改变CArGbox数量构建了5个GUS表达载体并转化野生型拟南芥.测序结果显示:AFDL的AP1启动子在核苷酸序列上与野生型拟南芥完全一致,这表明AP1在AFDL中的表达显著降低并不是启动子序列突变引起的;转基因植株的GUS表达模式说明了CArG1在花发育早期及后期激活基因的表达,CArG2在整个后期都对基因的表达有抑制作用,而CArG3在花发育初期就能抑制基因的表达,并且在中后期仍然保持了对下游基因的抑制作用,CArG box1、2、3对AP1的表达有显著但非决定性的影响.此外,还推测在AP1启动子0～-3 579 bp范围之外存在影响AP1在第4轮花器官表达的调控元件,-3 579 bp至-1 752 bp区域可促进AP1的表达,而AP1启动子-1759 bp至-1359 bp区域除CArG2外的其它元件对调节其表达无明显作用.
為瞭分析AP1的錶達調控模式,本研究剋隆瞭擬南芥花異常株繫AFDL的AP1啟動子,啟動子元件預測結果錶明:AP1啟動子中含有3箇結閤MADS調控因子的CArG box(從5'依次編號為CArG1、CArG2、CArG3),通過刪減AP1啟動子長度以及改變CArGbox數量構建瞭5箇GUS錶達載體併轉化野生型擬南芥.測序結果顯示:AFDL的AP1啟動子在覈苷痠序列上與野生型擬南芥完全一緻,這錶明AP1在AFDL中的錶達顯著降低併不是啟動子序列突變引起的;轉基因植株的GUS錶達模式說明瞭CArG1在花髮育早期及後期激活基因的錶達,CArG2在整箇後期都對基因的錶達有抑製作用,而CArG3在花髮育初期就能抑製基因的錶達,併且在中後期仍然保持瞭對下遊基因的抑製作用,CArG box1、2、3對AP1的錶達有顯著但非決定性的影響.此外,還推測在AP1啟動子0～-3 579 bp範圍之外存在影響AP1在第4輪花器官錶達的調控元件,-3 579 bp至-1 752 bp區域可促進AP1的錶達,而AP1啟動子-1759 bp至-1359 bp區域除CArG2外的其它元件對調節其錶達無明顯作用.
위료분석AP1적표체조공모식,본연구극륭료의남개화이상주계AFDL적AP1계동자,계동자원건예측결과표명:AP1계동자중함유3개결합MADS조공인자적CArG box(종5'의차편호위CArG1、CArG2、CArG3),통과산감AP1계동자장도이급개변CArGbox수량구건료5개GUS표체재체병전화야생형의남개.측서결과현시:AFDL적AP1계동자재핵감산서렬상여야생형의남개완전일치,저표명AP1재AFDL중적표체현저강저병불시계동자서렬돌변인기적;전기인식주적GUS표체모식설명료CArG1재화발육조기급후기격활기인적표체,CArG2재정개후기도대기인적표체유억제작용,이CArG3재화발육초기취능억제기인적표체,병차재중후기잉연보지료대하유기인적억제작용,CArG box1、2、3대AP1적표체유현저단비결정성적영향.차외,환추측재AP1계동자0～-3 579 bp범위지외존재영향AP1재제4륜화기관표체적조공원건,-3 579 bp지-1 752 bp구역가촉진AP1적표체,이AP1계동자-1759 bp지-1359 bp구역제CArG2외적기타원건대조절기표체무명현작용.
