广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
10期
152-154,前插4
,共4页
修江帆%魏川川%尚小丽%国果%吴沁怡%吴建伟
脩江帆%魏川川%尚小麗%國果%吳沁怡%吳建偉
수강범%위천천%상소려%국과%오심이%오건위
家蝇%羧肽酶%克隆%原核表达
傢蠅%羧肽酶%剋隆%原覈錶達
가승%최태매%극륭%원핵표체
从构建的家蝇幼虫cDNA质粒文库中筛选到羧肽酶(Carboxypeptidase,CP)基因,以该基因的cDNA文库质粒为模板,通过PCR扩增,获得CP基因完整编码序列(登录号:KF939629.1).运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽和亚细胞定位等进行预测和分析.构建PEASY-E1-CP重组质粒,转化到大肠杆菌OrigamiB (DE3)中进行诱导表达.研究结果表明,CP基因ORF全长1 284 bp,编码428个氨基酸,理论分子量47.8ku,等电点为6.10,具有CP家族的蛋白保守结构域;重组原核质粒pEASY-E1-CP经IPTG诱导,蛋白在大肠杆菌中获得表达.
從構建的傢蠅幼蟲cDNA質粒文庫中篩選到羧肽酶(Carboxypeptidase,CP)基因,以該基因的cDNA文庫質粒為模闆,通過PCR擴增,穫得CP基因完整編碼序列(登錄號:KF939629.1).運用生物信息學方法對該基因及其編碼蛋白的基本理化性質、信號肽和亞細胞定位等進行預測和分析.構建PEASY-E1-CP重組質粒,轉化到大腸桿菌OrigamiB (DE3)中進行誘導錶達.研究結果錶明,CP基因ORF全長1 284 bp,編碼428箇氨基痠,理論分子量47.8ku,等電點為6.10,具有CP傢族的蛋白保守結構域;重組原覈質粒pEASY-E1-CP經IPTG誘導,蛋白在大腸桿菌中穫得錶達.
종구건적가승유충cDNA질립문고중사선도최태매(Carboxypeptidase,CP)기인,이해기인적cDNA문고질립위모판,통과PCR확증,획득CP기인완정편마서렬(등록호:KF939629.1).운용생물신식학방법대해기인급기편마단백적기본이화성질、신호태화아세포정위등진행예측화분석.구건PEASY-E1-CP중조질립,전화도대장간균OrigamiB (DE3)중진행유도표체.연구결과표명,CP기인ORF전장1 284 bp,편마428개안기산,이론분자량47.8ku,등전점위6.10,구유CP가족적단백보수결구역;중조원핵질립pEASY-E1-CP경IPTG유도,단백재대장간균중획득표체.
