广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
10期
132-134,145
,共4页
程保平%鹿连明%彭埃天%赵弘巍%宋晓兵%陈霞
程保平%鹿連明%彭埃天%趙弘巍%宋曉兵%陳霞
정보평%록련명%팽애천%조홍외%송효병%진하
柑桔黄龙病菌%omp基因%原核表达%蛋白纯化
柑桔黃龍病菌%omp基因%原覈錶達%蛋白純化
감길황룡병균%omp기인%원핵표체%단백순화
为获得大量高纯度的柑桔黄龙病菌Omp外膜重组蛋白,应用PCR方法从染病柑桔模板中扩增出黄龙病菌omp基因的3个片段,将其克隆到pMDl9-T载体,再亚克隆到pET32a原核表达载体,构建pET32a-omp原核表达重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导并用SDS-PAGE电泳检测带组氨酸标签的Omp融合蛋白表达后,用镍柱分离纯化该融合蛋白.结果表明:柑桔黄龙病菌omp基因序列的两个片段在37℃经1 mmol/L IPTG诱导后,在大肠杆菌得到了高效表达;镍柱纯化蛋白得到预期大小(约55 ku)的融合蛋白.
為穫得大量高純度的柑桔黃龍病菌Omp外膜重組蛋白,應用PCR方法從染病柑桔模闆中擴增齣黃龍病菌omp基因的3箇片段,將其剋隆到pMDl9-T載體,再亞剋隆到pET32a原覈錶達載體,構建pET32a-omp原覈錶達重組質粒,然後轉化大腸桿菌BL21(DE3),經IPTG誘導併用SDS-PAGE電泳檢測帶組氨痠標籤的Omp融閤蛋白錶達後,用鎳柱分離純化該融閤蛋白.結果錶明:柑桔黃龍病菌omp基因序列的兩箇片段在37℃經1 mmol/L IPTG誘導後,在大腸桿菌得到瞭高效錶達;鎳柱純化蛋白得到預期大小(約55 ku)的融閤蛋白.
위획득대량고순도적감길황룡병균Omp외막중조단백,응용PCR방법종염병감길모판중확증출황룡병균omp기인적3개편단,장기극륭도pMDl9-T재체,재아극륭도pET32a원핵표체재체,구건pET32a-omp원핵표체중조질립,연후전화대장간균BL21(DE3),경IPTG유도병용SDS-PAGE전영검측대조안산표첨적Omp융합단백표체후,용얼주분리순화해융합단백.결과표명:감길황룡병균omp기인서렬적량개편단재37℃경1 mmol/L IPTG유도후,재대장간균득도료고효표체;얼주순화단백득도예기대소(약55 ku)적융합단백.
