广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
10期
120-125
,共6页
张金平%何晓明%江彪%谢大森%彭庆务%王永飞%马三梅
張金平%何曉明%江彪%謝大森%彭慶務%王永飛%馬三梅
장금평%하효명%강표%사대삼%팽경무%왕영비%마삼매
节瓜%实时荧光定量PCR%内参基因%镰刀菌酸胁迫
節瓜%實時熒光定量PCR%內參基因%鐮刀菌痠脅迫
절과%실시형광정량PCR%내삼기인%렴도균산협박
针对不同试验材料及条件选择合适的内参基因是正确利用实时荧光定量PCR分析目的基因表达模式的前提条件.以4个常用看家基因(GA PDH、Actin、UBQ、CYP)和2个新内参基因(CACS、F-box)作为候选内参基因,运用实时荧光定量PCR技术,分析它们在节瓜不同组织(根、茎、叶)及镰刀菌酸(fusaric acid,FA)胁迫下的表达稳定性.经RefFinder在线软件综合分析,结果表明,节瓜经枯萎病毒素FA胁迫后Actin和F-box表达稳定;而在节瓜不同组织中F-box基因表达稳定性最高;另外,传统常用看家基因GA PDH和CYP因在不同试验条件下总体表达水平都比较差而不适合作为相应条件下的内参基因.研究结果为节瓜抗枯萎病相关基因的表达分析奠定了基础.
針對不同試驗材料及條件選擇閤適的內參基因是正確利用實時熒光定量PCR分析目的基因錶達模式的前提條件.以4箇常用看傢基因(GA PDH、Actin、UBQ、CYP)和2箇新內參基因(CACS、F-box)作為候選內參基因,運用實時熒光定量PCR技術,分析它們在節瓜不同組織(根、莖、葉)及鐮刀菌痠(fusaric acid,FA)脅迫下的錶達穩定性.經RefFinder在線軟件綜閤分析,結果錶明,節瓜經枯萎病毒素FA脅迫後Actin和F-box錶達穩定;而在節瓜不同組織中F-box基因錶達穩定性最高;另外,傳統常用看傢基因GA PDH和CYP因在不同試驗條件下總體錶達水平都比較差而不適閤作為相應條件下的內參基因.研究結果為節瓜抗枯萎病相關基因的錶達分析奠定瞭基礎.
침대불동시험재료급조건선택합괄적내삼기인시정학이용실시형광정량PCR분석목적기인표체모식적전제조건.이4개상용간가기인(GA PDH、Actin、UBQ、CYP)화2개신내삼기인(CACS、F-box)작위후선내삼기인,운용실시형광정량PCR기술,분석타문재절과불동조직(근、경、협)급렴도균산(fusaric acid,FA)협박하적표체은정성.경RefFinder재선연건종합분석,결과표명,절과경고위병독소FA협박후Actin화F-box표체은정;이재절과불동조직중F-box기인표체은정성최고;령외,전통상용간가기인GA PDH화CYP인재불동시험조건하총체표체수평도비교차이불괄합작위상응조건하적내삼기인.연구결과위절과항고위병상관기인적표체분석전정료기출.
