中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2012年
5期
624-629
,共6页
杨云秀%胡孙宽%叶星照%白永恒%王斯璐%刘彪%王本泉%陈必成%陈宗静
楊雲秀%鬍孫寬%葉星照%白永恆%王斯璐%劉彪%王本泉%陳必成%陳宗靜
양운수%호손관%협성조%백영항%왕사로%류표%왕본천%진필성%진종정
曲古抑菌素A%胰腺癌%细胞凋亡%Notch通路
麯古抑菌素A%胰腺癌%細胞凋亡%Notch通路
곡고억균소A%이선암%세포조망%Notch통로
目的 探讨曲古抑菌素A( TSA)诱导胰腺癌细胞PANC-1细胞凋亡机制.方法 TSA 0.1～0.6 μmol·L -1培养PANC-1细胞0～48 h,MTT法检测细胞存活率并计算IC50.TSA 0.4 μmol·L -1 PANC-1 培养0 ～48 h,Hoechst 33258染色观察细胞核形态变化.TSA 0.4 μmol·L-1 PANC-1培养0～12h,检测胱天蛋白酶3活性.TSA 0.4 μmol·L-1与PANC-1培养24 h,实时定量PCR检测c-myc,p53,Bcl-2,Bax,存活素,基质金属蛋白酶1 (MMP1)和基质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)和Notch-1基因的表达.TSA 0.4和0.6 μmol·L-1与PANC-1培养24 h,细胞免疫化学方法检测Notch-1蛋白的胞内活性形式NICD表达.结果 TSA可以明显抑制PANC-1细胞增殖,12,24和48 h的IC50值分别为0.42,0.32和0.19 μmol·L-1,具有量效(r =0.640,P=0.01)和时效(r=0.768,P=0.002)关系.Hoechst 33258染色结果表明,TSA 0.4 μmol·L-1增加PANC-1细胞核的蓝色荧光并出现凋亡特征.TSA 0.4 μmol·L-1作用4,8和12 h后,胱天蛋白酶3的活性分别为正常对照组的1.62±0.12,2.68±0.17和(3.92±0.23)倍.PCR结果显示,TSA 0.4 μmol·L-1作用24 h后,p53,c-myc和存活素mRNA表达下降,分别为对照组的(18.3±5.1)％,(24.2±0.9)％和(15.8±1.0)％,Bcl-2和Notch-1 mRNA未见明显变化,而Bax,MMP1和TIMP-1 mRNA升高(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值降低到正常对照组的(13.0±2.8)％.Notch-1活性分子NICD明显升高(P＜0.05).结论 TSA可通过线粒体途径诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡,而且使Notch-1激活,促进转移相关基因表达.
目的 探討麯古抑菌素A( TSA)誘導胰腺癌細胞PANC-1細胞凋亡機製.方法 TSA 0.1～0.6 μmol·L -1培養PANC-1細胞0～48 h,MTT法檢測細胞存活率併計算IC50.TSA 0.4 μmol·L -1 PANC-1 培養0 ～48 h,Hoechst 33258染色觀察細胞覈形態變化.TSA 0.4 μmol·L-1 PANC-1培養0～12h,檢測胱天蛋白酶3活性.TSA 0.4 μmol·L-1與PANC-1培養24 h,實時定量PCR檢測c-myc,p53,Bcl-2,Bax,存活素,基質金屬蛋白酶1 (MMP1)和基質金屬蛋白酶1組織抑製劑(TIMP-1)和Notch-1基因的錶達.TSA 0.4和0.6 μmol·L-1與PANC-1培養24 h,細胞免疫化學方法檢測Notch-1蛋白的胞內活性形式NICD錶達.結果 TSA可以明顯抑製PANC-1細胞增殖,12,24和48 h的IC50值分彆為0.42,0.32和0.19 μmol·L-1,具有量效(r =0.640,P=0.01)和時效(r=0.768,P=0.002)關繫.Hoechst 33258染色結果錶明,TSA 0.4 μmol·L-1增加PANC-1細胞覈的藍色熒光併齣現凋亡特徵.TSA 0.4 μmol·L-1作用4,8和12 h後,胱天蛋白酶3的活性分彆為正常對照組的1.62±0.12,2.68±0.17和(3.92±0.23)倍.PCR結果顯示,TSA 0.4 μmol·L-1作用24 h後,p53,c-myc和存活素mRNA錶達下降,分彆為對照組的(18.3±5.1)％,(24.2±0.9)％和(15.8±1.0)％,Bcl-2和Notch-1 mRNA未見明顯變化,而Bax,MMP1和TIMP-1 mRNA升高(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值降低到正常對照組的(13.0±2.8)％.Notch-1活性分子NICD明顯升高(P＜0.05).結論 TSA可通過線粒體途徑誘導胰腺癌PANC-1細胞凋亡,而且使Notch-1激活,促進轉移相關基因錶達.
목적 탐토곡고억균소A( TSA)유도이선암세포PANC-1세포조망궤제.방법 TSA 0.1～0.6 μmol·L -1배양PANC-1세포0～48 h,MTT법검측세포존활솔병계산IC50.TSA 0.4 μmol·L -1 PANC-1 배양0 ～48 h,Hoechst 33258염색관찰세포핵형태변화.TSA 0.4 μmol·L-1 PANC-1배양0～12h,검측광천단백매3활성.TSA 0.4 μmol·L-1여PANC-1배양24 h,실시정량PCR검측c-myc,p53,Bcl-2,Bax,존활소,기질금속단백매1 (MMP1)화기질금속단백매1조직억제제(TIMP-1)화Notch-1기인적표체.TSA 0.4화0.6 μmol·L-1여PANC-1배양24 h,세포면역화학방법검측Notch-1단백적포내활성형식NICD표체.결과 TSA가이명현억제PANC-1세포증식,12,24화48 h적IC50치분별위0.42,0.32화0.19 μmol·L-1,구유량효(r =0.640,P=0.01)화시효(r=0.768,P=0.002)관계.Hoechst 33258염색결과표명,TSA 0.4 μmol·L-1증가PANC-1세포핵적람색형광병출현조망특정.TSA 0.4 μmol·L-1작용4,8화12 h후,광천단백매3적활성분별위정상대조조적1.62±0.12,2.68±0.17화(3.92±0.23)배.PCR결과현시,TSA 0.4 μmol·L-1작용24 h후,p53,c-myc화존활소mRNA표체하강,분별위대조조적(18.3±5.1)％,(24.2±0.9)％화(15.8±1.0)％,Bcl-2화Notch-1 mRNA미견명현변화,이Bax,MMP1화TIMP-1 mRNA승고(P＜0.05),Bcl-2/Bax비치강저도정상대조조적(13.0±2.8)％.Notch-1활성분자NICD명현승고(P＜0.05).결론 TSA가통과선립체도경유도이선암PANC-1세포조망,이차사Notch-1격활,촉진전이상관기인표체.
