农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2012年
7期
815-821
,共7页
王小海%杨力侠%吴勇延%杜娟%唐波%郭泽坤
王小海%楊力俠%吳勇延%杜娟%唐波%郭澤坤
왕소해%양력협%오용연%두연%당파%곽택곤
Gli-similar-1(Glis1)%Tspan18%诱导性多能干细胞(iPSCs)%亚细胞定位
Gli-similar-1(Glis1)%Tspan18%誘導性多能榦細胞(iPSCs)%亞細胞定位
Gli-similar-1(Glis1)%Tspan18%유도성다능간세포(iPSCs)%아세포정위
Gli-similar-1(Glis1)是一种在小鼠卵母细胞和受精卵一、二细胞期高表达蛋白,在小鼠胚胎发育中起着重要的作用.本实验以小鼠(Mus musculus)肾为材料,克隆小鼠Glis1基因,并构建与绿色荧光蛋白融合表达的真核表达载体pEGFP-C 1-Glis1.研究了Glis1蛋白的表达和亚细胞定位,并利用qPCR检测过表达Glis1对Oct4、Sox2、c-Myc、N-Myc、Klf4、Nanog、Nrgn和Tspan18等基因表达的影响.结果表明,从小鼠肾中成功克隆到Glis1的一个新转录本(GenBank登录号:JQ043365),其第三个核定位信号缺失4个氨基酸,C端结构域缺失124个氨基酸,包括富含脯氨酸结构域全部氨基酸序列.Glis1定位于细胞核,过表达能够显著上调Tspan18.研究结果表明,Glis1新转录本与现有转录本亚细胞定位结果一致,其在小鼠胚胎发育和小鼠成纤维细胞重编程过程中可能发挥不同的功能.
Gli-similar-1(Glis1)是一種在小鼠卵母細胞和受精卵一、二細胞期高錶達蛋白,在小鼠胚胎髮育中起著重要的作用.本實驗以小鼠(Mus musculus)腎為材料,剋隆小鼠Glis1基因,併構建與綠色熒光蛋白融閤錶達的真覈錶達載體pEGFP-C 1-Glis1.研究瞭Glis1蛋白的錶達和亞細胞定位,併利用qPCR檢測過錶達Glis1對Oct4、Sox2、c-Myc、N-Myc、Klf4、Nanog、Nrgn和Tspan18等基因錶達的影響.結果錶明,從小鼠腎中成功剋隆到Glis1的一箇新轉錄本(GenBank登錄號:JQ043365),其第三箇覈定位信號缺失4箇氨基痠,C耑結構域缺失124箇氨基痠,包括富含脯氨痠結構域全部氨基痠序列.Glis1定位于細胞覈,過錶達能夠顯著上調Tspan18.研究結果錶明,Glis1新轉錄本與現有轉錄本亞細胞定位結果一緻,其在小鼠胚胎髮育和小鼠成纖維細胞重編程過程中可能髮揮不同的功能.
Gli-similar-1(Glis1)시일충재소서란모세포화수정란일、이세포기고표체단백,재소서배태발육중기착중요적작용.본실험이소서(Mus musculus)신위재료,극륭소서Glis1기인,병구건여록색형광단백융합표체적진핵표체재체pEGFP-C 1-Glis1.연구료Glis1단백적표체화아세포정위,병이용qPCR검측과표체Glis1대Oct4、Sox2、c-Myc、N-Myc、Klf4、Nanog、Nrgn화Tspan18등기인표체적영향.결과표명,종소서신중성공극륭도Glis1적일개신전록본(GenBank등록호:JQ043365),기제삼개핵정위신호결실4개안기산,C단결구역결실124개안기산,포괄부함포안산결구역전부안기산서렬.Glis1정위우세포핵,과표체능구현저상조Tspan18.연구결과표명,Glis1신전록본여현유전록본아세포정위결과일치,기재소서배태발육화소서성섬유세포중편정과정중가능발휘불동적공능.