农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2012年
7期
745-755
,共11页
刘蕾%徐进%许景升%张丽勍%张昊%冯洁
劉蕾%徐進%許景升%張麗勍%張昊%馮潔
류뢰%서진%허경승%장려경%장호%풍길
青枯菌%抑制性差减杂交%Ⅲ型分泌系统效应子%致病性
青枯菌%抑製性差減雜交%Ⅲ型分泌繫統效應子%緻病性
청고균%억제성차감잡교%Ⅲ형분비계통효응자%치병성
植物青枯菌(Ralstonia solanacearum)致病力分化菌株Po82兼具2号小种和NPB(非香蕉致病)菌株的致病特征.为了研究该菌株致病力分化机理,本实验以Po82为待测菌株,构建了抑制性差减杂交文库.建库质量分析结果表明,具有较高的接头连接以及文库构建效率,插入片段平均长度为300 bp,文库构建质量较好.对文库中随机挑取阳性克隆进行测序,共筛选出44个Po82菌株差异基因.生物信息学分析结果表明,所得差异基因主要涉及新陈代谢、转座酶、膜结构、分泌蛋白、毒力、转录因子以及未知功能等.利用基因敲除技术对其中的c00283基因功能进行了研究,结果表明,该基因在Po82菌株致病过程中起重要作用.半定量RT-PCR结果表明,c00283基因在hrp诱导培养基中的表达情况与hrpB基因一致,初步确定其为Ⅲ型分泌系统效应子.基础生物学实验结果表明,该基因对Po82菌株的生长、生物膜形成及运动性没有影响.青枯菌Po82菌株抑制性差减杂交文库的构建及致病相关基因的功能分析,为后续致病力分化的分子机理研究提供基础材料.
植物青枯菌(Ralstonia solanacearum)緻病力分化菌株Po82兼具2號小種和NPB(非香蕉緻病)菌株的緻病特徵.為瞭研究該菌株緻病力分化機理,本實驗以Po82為待測菌株,構建瞭抑製性差減雜交文庫.建庫質量分析結果錶明,具有較高的接頭連接以及文庫構建效率,插入片段平均長度為300 bp,文庫構建質量較好.對文庫中隨機挑取暘性剋隆進行測序,共篩選齣44箇Po82菌株差異基因.生物信息學分析結果錶明,所得差異基因主要涉及新陳代謝、轉座酶、膜結構、分泌蛋白、毒力、轉錄因子以及未知功能等.利用基因敲除技術對其中的c00283基因功能進行瞭研究,結果錶明,該基因在Po82菌株緻病過程中起重要作用.半定量RT-PCR結果錶明,c00283基因在hrp誘導培養基中的錶達情況與hrpB基因一緻,初步確定其為Ⅲ型分泌繫統效應子.基礎生物學實驗結果錶明,該基因對Po82菌株的生長、生物膜形成及運動性沒有影響.青枯菌Po82菌株抑製性差減雜交文庫的構建及緻病相關基因的功能分析,為後續緻病力分化的分子機理研究提供基礎材料.
식물청고균(Ralstonia solanacearum)치병력분화균주Po82겸구2호소충화NPB(비향초치병)균주적치병특정.위료연구해균주치병력분화궤리,본실험이Po82위대측균주,구건료억제성차감잡교문고.건고질량분석결과표명,구유교고적접두련접이급문고구건효솔,삽입편단평균장도위300 bp,문고구건질량교호.대문고중수궤도취양성극륭진행측서,공사선출44개Po82균주차이기인.생물신식학분석결과표명,소득차이기인주요섭급신진대사、전좌매、막결구、분비단백、독력、전록인자이급미지공능등.이용기인고제기술대기중적c00283기인공능진행료연구,결과표명,해기인재Po82균주치병과정중기중요작용.반정량RT-PCR결과표명,c00283기인재hrp유도배양기중적표체정황여hrpB기인일치,초보학정기위Ⅲ형분비계통효응자.기출생물학실험결과표명,해기인대Po82균주적생장、생물막형성급운동성몰유영향.청고균Po82균주억제성차감잡교문고적구건급치병상관기인적공능분석,위후속치병력분화적분자궤리연구제공기출재료.
