农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2012年
7期
726-734
,共9页
成德%高星%李珍珍%高祎%刘亚军%鲍建昌%王华岩
成德%高星%李珍珍%高祎%劉亞軍%鮑建昌%王華巖
성덕%고성%리진진%고의%류아군%포건창%왕화암
Y-27632%猪诱导多能干细胞(iPS细胞)%Rho相关蛋白激酶(ROCK)%冻存%凋亡
Y-27632%豬誘導多能榦細胞(iPS細胞)%Rho相關蛋白激酶(ROCK)%凍存%凋亡
Y-27632%저유도다능간세포(iPS세포)%Rho상관단백격매(ROCK)%동존%조망
猪作为重要的疾病模型动物,目前猪诱导多能干细胞(iPS细胞)已有建系,但是细胞的冻存和传代的效率较低,影响后续的实验研究.Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂Y-27632可提高人胚胎干细胞的解冻存活率,促进其克隆形成.本实验以猪(Sus scrofa)iPS细胞为研究对象,通过在猪iPS细胞冻存和解冻过程中添加Y-27632,发现其可以减少猪iPS细胞在冻存和解冻复苏过程中的凋亡.在细胞的传代过程中,使用Y-27632可以促进猪iPS细胞的贴壁和克隆形成.虽然高浓度Y-27632会对猪iPS克隆的形态产生一定的影响,但并未影响细胞的碱性磷酸酶(AP)活性和多能性基因Oct4、Sox2和Nanog的表达水平.最后将转座子报告质粒PB[Act-RFP]DS导入猪iPS细胞中,经流式筛选后得到的带有红色荧光的细胞,并将其注射于猪孤雌胚胎中进行发育能力检测,发现Y-27632的处理能减少细胞在流式筛选和胚胎注射中的凋亡,促进其在胚胎内的嵌合发育.研究结果说明,ROCK抑制剂Y-27632可以提高猪iPS细胞冻存和传代的效率,促进其在胚胎中的嵌合.该研究有助于猪iPS细胞及其他多能干细胞的保存,传代和筛选等相关研究.
豬作為重要的疾病模型動物,目前豬誘導多能榦細胞(iPS細胞)已有建繫,但是細胞的凍存和傳代的效率較低,影響後續的實驗研究.Rho相關蛋白激酶(ROCK)抑製劑Y-27632可提高人胚胎榦細胞的解凍存活率,促進其剋隆形成.本實驗以豬(Sus scrofa)iPS細胞為研究對象,通過在豬iPS細胞凍存和解凍過程中添加Y-27632,髮現其可以減少豬iPS細胞在凍存和解凍複囌過程中的凋亡.在細胞的傳代過程中,使用Y-27632可以促進豬iPS細胞的貼壁和剋隆形成.雖然高濃度Y-27632會對豬iPS剋隆的形態產生一定的影響,但併未影響細胞的堿性燐痠酶(AP)活性和多能性基因Oct4、Sox2和Nanog的錶達水平.最後將轉座子報告質粒PB[Act-RFP]DS導入豬iPS細胞中,經流式篩選後得到的帶有紅色熒光的細胞,併將其註射于豬孤雌胚胎中進行髮育能力檢測,髮現Y-27632的處理能減少細胞在流式篩選和胚胎註射中的凋亡,促進其在胚胎內的嵌閤髮育.研究結果說明,ROCK抑製劑Y-27632可以提高豬iPS細胞凍存和傳代的效率,促進其在胚胎中的嵌閤.該研究有助于豬iPS細胞及其他多能榦細胞的保存,傳代和篩選等相關研究.
저작위중요적질병모형동물,목전저유도다능간세포(iPS세포)이유건계,단시세포적동존화전대적효솔교저,영향후속적실험연구.Rho상관단백격매(ROCK)억제제Y-27632가제고인배태간세포적해동존활솔,촉진기극륭형성.본실험이저(Sus scrofa)iPS세포위연구대상,통과재저iPS세포동존화해동과정중첨가Y-27632,발현기가이감소저iPS세포재동존화해동복소과정중적조망.재세포적전대과정중,사용Y-27632가이촉진저iPS세포적첩벽화극륭형성.수연고농도Y-27632회대저iPS극륭적형태산생일정적영향,단병미영향세포적감성린산매(AP)활성화다능성기인Oct4、Sox2화Nanog적표체수평.최후장전좌자보고질립PB[Act-RFP]DS도입저iPS세포중,경류식사선후득도적대유홍색형광적세포,병장기주사우저고자배태중진행발육능력검측,발현Y-27632적처리능감소세포재류식사선화배태주사중적조망,촉진기재배태내적감합발육.연구결과설명,ROCK억제제Y-27632가이제고저iPS세포동존화전대적효솔,촉진기재배태중적감합.해연구유조우저iPS세포급기타다능간세포적보존,전대화사선등상관연구.
