医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2012年
9期
71-74
,共4页
线粒体融合素基因-2%HepG2细胞%葡萄糖代谢%丝/苏氨酸蛋白激酶
線粒體融閤素基因-2%HepG2細胞%葡萄糖代謝%絲/囌氨痠蛋白激酶
선립체융합소기인-2%HepG2세포%포도당대사%사/소안산단백격매
目的 研究线粒体融合素基因-2(mitofusin -2,Mfn2)沉默对人肝癌细胞株(HepG2)葡萄糖代谢和胰岛素信号通路分子丝/苏氨酸蛋白激酶( Akt1)的影响.方法 构建Mfn2短发夹双链RNA(Mfn2shRNA)和阴性对照短发夹双链RNA(HK),将HepG2细胞株分为空白对照组(NC)、阴性对照组(HK)、Mfn2shRNA质粒转染组(Mfn2).HK和Mfn2组细胞应用lipofectamine2000转染HepG2细胞株；采用葡萄糖氧化酶的方法和氚标记葡萄糖(3-3H- Glucose)放射性核素示踪法检测细胞葡萄糖消耗量和摄取率；Western blotting检测Mfn2和Akt1蛋白表达.结果 与HK组比较,Mfn2组细胞Mfn2蛋白表达明显下降(0.23 ±0.05 vs 0.51 ±0.14,P=0.034),Akt1表达差异无统计学意义(0.13 ±0.00 vs 0.14 ±0.01,P=0.055)；Mfn2组细胞葡萄糖消耗量明显下降(8.72±0.62 vs 9.75 ±0.35,P=0.001),葡萄糖摄取率亦显著下降(7.94±0.04 vs 9.64±0.13,P=0.002).结论 抑制Mfn2基因表达导致HepG2细胞葡萄糖代谢下降；Mfn2表达对葡萄糖代谢的影响是否通过PI3K/Akt信号通路介导还需要进一步研究.
目的 研究線粒體融閤素基因-2(mitofusin -2,Mfn2)沉默對人肝癌細胞株(HepG2)葡萄糖代謝和胰島素信號通路分子絲/囌氨痠蛋白激酶( Akt1)的影響.方法 構建Mfn2短髮夾雙鏈RNA(Mfn2shRNA)和陰性對照短髮夾雙鏈RNA(HK),將HepG2細胞株分為空白對照組(NC)、陰性對照組(HK)、Mfn2shRNA質粒轉染組(Mfn2).HK和Mfn2組細胞應用lipofectamine2000轉染HepG2細胞株；採用葡萄糖氧化酶的方法和氚標記葡萄糖(3-3H- Glucose)放射性覈素示蹤法檢測細胞葡萄糖消耗量和攝取率；Western blotting檢測Mfn2和Akt1蛋白錶達.結果 與HK組比較,Mfn2組細胞Mfn2蛋白錶達明顯下降(0.23 ±0.05 vs 0.51 ±0.14,P=0.034),Akt1錶達差異無統計學意義(0.13 ±0.00 vs 0.14 ±0.01,P=0.055)；Mfn2組細胞葡萄糖消耗量明顯下降(8.72±0.62 vs 9.75 ±0.35,P=0.001),葡萄糖攝取率亦顯著下降(7.94±0.04 vs 9.64±0.13,P=0.002).結論 抑製Mfn2基因錶達導緻HepG2細胞葡萄糖代謝下降；Mfn2錶達對葡萄糖代謝的影響是否通過PI3K/Akt信號通路介導還需要進一步研究.
목적 연구선립체융합소기인-2(mitofusin -2,Mfn2)침묵대인간암세포주(HepG2)포도당대사화이도소신호통로분자사/소안산단백격매( Akt1)적영향.방법 구건Mfn2단발협쌍련RNA(Mfn2shRNA)화음성대조단발협쌍련RNA(HK),장HepG2세포주분위공백대조조(NC)、음성대조조(HK)、Mfn2shRNA질립전염조(Mfn2).HK화Mfn2조세포응용lipofectamine2000전염HepG2세포주；채용포도당양화매적방법화천표기포도당(3-3H- Glucose)방사성핵소시종법검측세포포도당소모량화섭취솔；Western blotting검측Mfn2화Akt1단백표체.결과 여HK조비교,Mfn2조세포Mfn2단백표체명현하강(0.23 ±0.05 vs 0.51 ±0.14,P=0.034),Akt1표체차이무통계학의의(0.13 ±0.00 vs 0.14 ±0.01,P=0.055)；Mfn2조세포포도당소모량명현하강(8.72±0.62 vs 9.75 ±0.35,P=0.001),포도당섭취솔역현저하강(7.94±0.04 vs 9.64±0.13,P=0.002).결론 억제Mfn2기인표체도치HepG2세포포도당대사하강；Mfn2표체대포도당대사적영향시부통과PI3K/Akt신호통로개도환수요진일보연구.
