中国药物与临床
中國藥物與臨床
중국약물여림상
CHINESE REMEDIES & CLINICS
2012年
11期
1397-1399
,共3页
田彦璋%赵浩亮%贺杰峰%李辉宇%韩建立
田彥璋%趙浩亮%賀傑峰%李輝宇%韓建立
전언장%조호량%하걸봉%리휘우%한건립
肝肿瘤%葡萄糖神经酰胺合成酶基因%多药耐药基因
肝腫瘤%葡萄糖神經酰胺閤成酶基因%多藥耐藥基因
간종류%포도당신경선알합성매기인%다약내약기인
目的 观察葡萄糖神经酰胺合酶(GCS)基因高表达对肝癌细胞HepG2内多药耐药基因(MDR1)表达的影响,探讨GCS基因参与肝癌多药耐药的作用机制.方法 脂质体法将GCS基因真核表达质粒pEGFP-GCS导入肝癌细胞株HepG2中,应用G418筛选培养,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞GCSmRNA和MDR1 mRNA的表达,蛋白印迹法检测细胞GCS蛋白和P-糖蛋白(P-gp)的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测基因转染前后阿霉素对HepG2细胞半数抑制浓度(IC50)的变化.结果 转染后HepG2细胞内GCS mRNA和蛋白的表达水平显著提高(P＜0.05),而MDR1 mRNA及P-gp的表达水平亦显著提高(P＜0.05) ;同时,MTT法检测结果显示GCS基因转染后HepG2细胞对阿霉素的耐药性显著提高(P＜0.05),IC50从(6.2±0.4)μg/ml上升到(11.6±1.0) μg/ml.结论 高表达GCS可以上调HepG2细胞中MDR1的表达,使HepG2细胞发生多药耐药.
目的 觀察葡萄糖神經酰胺閤酶(GCS)基因高錶達對肝癌細胞HepG2內多藥耐藥基因(MDR1)錶達的影響,探討GCS基因參與肝癌多藥耐藥的作用機製.方法 脂質體法將GCS基因真覈錶達質粒pEGFP-GCS導入肝癌細胞株HepG2中,應用G418篩選培養,反轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測細胞GCSmRNA和MDR1 mRNA的錶達,蛋白印跡法檢測細胞GCS蛋白和P-糖蛋白(P-gp)的錶達,四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測基因轉染前後阿黴素對HepG2細胞半數抑製濃度(IC50)的變化.結果 轉染後HepG2細胞內GCS mRNA和蛋白的錶達水平顯著提高(P＜0.05),而MDR1 mRNA及P-gp的錶達水平亦顯著提高(P＜0.05) ;同時,MTT法檢測結果顯示GCS基因轉染後HepG2細胞對阿黴素的耐藥性顯著提高(P＜0.05),IC50從(6.2±0.4)μg/ml上升到(11.6±1.0) μg/ml.結論 高錶達GCS可以上調HepG2細胞中MDR1的錶達,使HepG2細胞髮生多藥耐藥.
목적 관찰포도당신경선알합매(GCS)기인고표체대간암세포HepG2내다약내약기인(MDR1)표체적영향,탐토GCS기인삼여간암다약내약적작용궤제.방법 지질체법장GCS기인진핵표체질립pEGFP-GCS도입간암세포주HepG2중,응용G418사선배양,반전록취합매련반응(RT-PCR)검측세포GCSmRNA화MDR1 mRNA적표체,단백인적법검측세포GCS단백화P-당단백(P-gp)적표체,사갑기우담서람(MTT)법검측기인전염전후아매소대HepG2세포반수억제농도(IC50)적변화.결과 전염후HepG2세포내GCS mRNA화단백적표체수평현저제고(P＜0.05),이MDR1 mRNA급P-gp적표체수평역현저제고(P＜0.05) ;동시,MTT법검측결과현시GCS기인전염후HepG2세포대아매소적내약성현저제고(P＜0.05),IC50종(6.2±0.4)μg/ml상승도(11.6±1.0) μg/ml.결론 고표체GCS가이상조HepG2세포중MDR1적표체,사HepG2세포발생다약내약.
