中国神经精神疾病杂志
中國神經精神疾病雜誌
중국신경정신질병잡지
CHINESE JOURNAL OF NERVOUS AND MENTAL DISEASES
2013年
3期
129-134
,共6页
刘志峰%杨学军%刘彬%陈聪%任炳成%王垒垒%赵恺%于圣平%明浩朗
劉誌峰%楊學軍%劉彬%陳聰%任炳成%王壘壘%趙愷%于聖平%明浩朗
류지봉%양학군%류빈%진총%임병성%왕루루%조개%우골평%명호랑
胶质瘤%片状伪足Arp2/3复合物RNA干扰
膠質瘤%片狀偽足Arp2/3複閤物RNA榦擾
효질류%편상위족Arp2/3복합물RNA간우
目的 研究RNA干扰技术沉默Arp2/3复合物后对胶质瘤细胞片状伪足以及运动能力的影响.方法 脂质体介导Arp3-siRNA转染体外常规培养的U251胶质瘤细胞,同时设siRNA-NC(阴性对照组,n=3)组和siRNA-N(空白对照组,n=3)组.RT-PCR和western blot方法验证三组中Arp3 mRNA和蛋白的表达情况.免疫荧光检测不同处理组的Arp2/3复合物定位以及细胞形态变化.Transwell细胞侵袭实验和划痕实验检测三组细胞的运动能力.结果 三组细胞的Arp3 mRNA相对表达水平分别为:19.33％±2.08％、97.33％±2.38％和96.67％±2.52％(P＜0.01)；三组细胞蛋白相对表达量分别为20.00％±3.00％、85.33％±3.21％和84.33％±4.04％ (P＜0.01).与siRNA-N组比较,siRNA-Arp3组胶质瘤细胞Arp3 mRNA和蛋白的表达水平下调分别达80％和76％.免疫荧光结果显示siRNA-Arp3组细胞较siRNA-NC组和siRNA-N组细胞片状伪足明显变小甚至消失.Transwell细胞侵袭实验和划痕实验显示siRNA-Arp3组胶质瘤细胞运动能力较siRNA-N组分别下降达69％ (P＜ 0.01)和68％(P＜0.01).结论 Arp2/3复合物通过影响片状伪足的形成,从而在胶质瘤细胞的运动过程中发挥重要作用,提示Arp2/3复合物可作为治疗脑胶质瘤的一个候选靶点.
目的 研究RNA榦擾技術沉默Arp2/3複閤物後對膠質瘤細胞片狀偽足以及運動能力的影響.方法 脂質體介導Arp3-siRNA轉染體外常規培養的U251膠質瘤細胞,同時設siRNA-NC(陰性對照組,n=3)組和siRNA-N(空白對照組,n=3)組.RT-PCR和western blot方法驗證三組中Arp3 mRNA和蛋白的錶達情況.免疫熒光檢測不同處理組的Arp2/3複閤物定位以及細胞形態變化.Transwell細胞侵襲實驗和劃痕實驗檢測三組細胞的運動能力.結果 三組細胞的Arp3 mRNA相對錶達水平分彆為:19.33％±2.08％、97.33％±2.38％和96.67％±2.52％(P＜0.01)；三組細胞蛋白相對錶達量分彆為20.00％±3.00％、85.33％±3.21％和84.33％±4.04％ (P＜0.01).與siRNA-N組比較,siRNA-Arp3組膠質瘤細胞Arp3 mRNA和蛋白的錶達水平下調分彆達80％和76％.免疫熒光結果顯示siRNA-Arp3組細胞較siRNA-NC組和siRNA-N組細胞片狀偽足明顯變小甚至消失.Transwell細胞侵襲實驗和劃痕實驗顯示siRNA-Arp3組膠質瘤細胞運動能力較siRNA-N組分彆下降達69％ (P＜ 0.01)和68％(P＜0.01).結論 Arp2/3複閤物通過影響片狀偽足的形成,從而在膠質瘤細胞的運動過程中髮揮重要作用,提示Arp2/3複閤物可作為治療腦膠質瘤的一箇候選靶點.
목적 연구RNA간우기술침묵Arp2/3복합물후대효질류세포편상위족이급운동능력적영향.방법 지질체개도Arp3-siRNA전염체외상규배양적U251효질류세포,동시설siRNA-NC(음성대조조,n=3)조화siRNA-N(공백대조조,n=3)조.RT-PCR화western blot방법험증삼조중Arp3 mRNA화단백적표체정황.면역형광검측불동처리조적Arp2/3복합물정위이급세포형태변화.Transwell세포침습실험화화흔실험검측삼조세포적운동능력.결과 삼조세포적Arp3 mRNA상대표체수평분별위:19.33％±2.08％、97.33％±2.38％화96.67％±2.52％(P＜0.01)；삼조세포단백상대표체량분별위20.00％±3.00％、85.33％±3.21％화84.33％±4.04％ (P＜0.01).여siRNA-N조비교,siRNA-Arp3조효질류세포Arp3 mRNA화단백적표체수평하조분별체80％화76％.면역형광결과현시siRNA-Arp3조세포교siRNA-NC조화siRNA-N조세포편상위족명현변소심지소실.Transwell세포침습실험화화흔실험현시siRNA-Arp3조효질류세포운동능력교siRNA-N조분별하강체69％ (P＜ 0.01)화68％(P＜0.01).결론 Arp2/3복합물통과영향편상위족적형성,종이재효질류세포적운동과정중발휘중요작용,제시Arp2/3복합물가작위치료뇌효질류적일개후선파점.
