中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2014年
1期
72-76
,共5页
张德太%左曙蓉%杨文%石伍和%涂启明%梁涛%张科
張德太%左曙蓉%楊文%石伍和%塗啟明%樑濤%張科
장덕태%좌서용%양문%석오화%도계명%량도%장과
转酮醇酶样基因1%低氧诱导因子1α%糖酵解
轉酮醇酶樣基因1%低氧誘導因子1α%糖酵解
전동순매양기인1%저양유도인자1α%당효해
Transketolase-like gene 1%Hypoxia-inducible factor 1 α%Glycolysis
目的:通过siRNA技术沉默宫颈癌细胞转酮醇酶样基因-1(TKTL1)后观察其在缺氧条件下低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达水平及糖酵解途径中2个关键酶己糖激酶Ⅱ(HK-Ⅱ)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化情况,旨在探讨肿瘤细胞TKTL1表达与糖酵解途径的关系.方法:用构建的靶向TKTL1基因siRNA干扰质粒载体转染HeLa细胞株,RT-PCR检测TKTL1 mRNA表达并结合转酮醇酶(TKT)活性测定判断其干扰效率;以未转染HeLa细胞为对照,进一步观察TKTL1沉默的癌细胞在缺氧条件下HIF-1 α和HK-Ⅱ表达水平,以及HK-Ⅱ和LDH活性的变化.结果:siRNA沉默HeLa细胞TKTL1基因后TKTL1 mRNA表达下降,TKT活性显著降低(P＜0.01),HIF-1α和HK-Ⅱ表达水平及HK-Ⅱ和LDH活性较对照组细胞均显著降低(P＜0.01).结论:沉默肿瘤细胞TKTL1基因能下调HIF-1α表达并降低糖酵解代谢关键酶活性,从而影响肿瘤细胞的恶性表型.
目的:通過siRNA技術沉默宮頸癌細胞轉酮醇酶樣基因-1(TKTL1)後觀察其在缺氧條件下低氧誘導因子1α(HIF-1α)錶達水平及糖酵解途徑中2箇關鍵酶己糖激酶Ⅱ(HK-Ⅱ)和乳痠脫氫酶(LDH)活性的變化情況,旨在探討腫瘤細胞TKTL1錶達與糖酵解途徑的關繫.方法:用構建的靶嚮TKTL1基因siRNA榦擾質粒載體轉染HeLa細胞株,RT-PCR檢測TKTL1 mRNA錶達併結閤轉酮醇酶(TKT)活性測定判斷其榦擾效率;以未轉染HeLa細胞為對照,進一步觀察TKTL1沉默的癌細胞在缺氧條件下HIF-1 α和HK-Ⅱ錶達水平,以及HK-Ⅱ和LDH活性的變化.結果:siRNA沉默HeLa細胞TKTL1基因後TKTL1 mRNA錶達下降,TKT活性顯著降低(P＜0.01),HIF-1α和HK-Ⅱ錶達水平及HK-Ⅱ和LDH活性較對照組細胞均顯著降低(P＜0.01).結論:沉默腫瘤細胞TKTL1基因能下調HIF-1α錶達併降低糖酵解代謝關鍵酶活性,從而影響腫瘤細胞的噁性錶型.
목적:통과siRNA기술침묵궁경암세포전동순매양기인-1(TKTL1)후관찰기재결양조건하저양유도인자1α(HIF-1α)표체수평급당효해도경중2개관건매기당격매Ⅱ(HK-Ⅱ)화유산탈경매(LDH)활성적변화정황,지재탐토종류세포TKTL1표체여당효해도경적관계.방법:용구건적파향TKTL1기인siRNA간우질립재체전염HeLa세포주,RT-PCR검측TKTL1 mRNA표체병결합전동순매(TKT)활성측정판단기간우효솔;이미전염HeLa세포위대조,진일보관찰TKTL1침묵적암세포재결양조건하HIF-1 α화HK-Ⅱ표체수평,이급HK-Ⅱ화LDH활성적변화.결과:siRNA침묵HeLa세포TKTL1기인후TKTL1 mRNA표체하강,TKT활성현저강저(P＜0.01),HIF-1α화HK-Ⅱ표체수평급HK-Ⅱ화LDH활성교대조조세포균현저강저(P＜0.01).결론:침묵종류세포TKTL1기인능하조HIF-1α표체병강저당효해대사관건매활성,종이영향종류세포적악성표형.
