中华细胞与干细胞杂志(电子版)
中華細胞與榦細胞雜誌(電子版)
중화세포여간세포잡지(전자판)
CHINESE JOURNAL OF CELL AND STEM CELL
2013年
3期
17-22
,共6页
贾国力%冉华中%季亢挺%王海珠%魏振衡%郁华%王魁风%邢程
賈國力%冉華中%季亢挺%王海珠%魏振衡%鬱華%王魁風%邢程
가국력%염화중%계항정%왕해주%위진형%욱화%왕괴풍%형정
3,4苯并芘%内皮祖细胞%迁移能力%成血管能力
3,4苯併芘%內皮祖細胞%遷移能力%成血管能力
3,4분병비%내피조세포%천이능력%성혈관능력
Benzo(a)pyrene%Endothelial progenitor cell%Migration%Vasculogenesis
目的 研究3,4苯并芘(BaP)对人脐血来源的内皮祖细胞(EPC)生物学功能的影响.方法 密度梯度离心法分离获取人脐血单个核细胞,采用贴壁培养法培养MNC中的EPC,通过Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)摄取实验和FITC标记的植物凝集素(FITC-UEA-I lectin)结合实验鉴定细胞.消化收集第3代细胞,分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、黏附能力测定实验、Transwell小室法及Matrigel体外成血管试验观察BaP对EPC增殖能力、黏附能力、迁移能力及成血管能力的影响,并检测各组细胞培养上清液SOD含量.采用单因素方差分析及LSD-t检验进行统计学分析.结果 采用贴壁培养法能成功培养出EPC;与正常对照组相比,BaP呈浓度依赖性降低EPC的增殖能力{正常对照组OD(1.02士0.04)显著高于BaP各组[BaP①组OD (0.66士0.04),BaP②组OD (0.55±0.04),BaP③组OD (0.35±0.05),均P<0.01],BaP染毒组间增殖能力差异亦有统计学意义(两两比较,均P<0.01)};与正常对照组比较,BaP呈浓度依赖性降低EPC的黏附能力{正常对照组[(117.50士17.16)个/200倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组(80.00士14.46)个/200倍镜,BaP②组(66.00士9.06)个/200倍镜,BaP③组(49.80±10.72)个/200倍镜,均P<0.01],BaP染毒组间黏附能力差异亦有统计学意义(两两比较,均P<0.05)};与正常对照组相比,EPC的迁移能力亦呈BaP浓度依赖性降低{正常对照组[(46.10士4.51)个/400倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组(35.50士4.95)个/400倍镜,BaP②组(26.80士4.08)个/400倍镜,BaP③组(19.50±2.84)个/400倍镜,均P<0.01],BaP染毒组间迁移能力差异亦有统计学意义(两两比较,均P<0.01)};与正常对照组比较,EPC的成血管能力亦呈BaP浓度依赖性降低{正常对照组[(33.20士3.70)个/100倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组(22.00士3.39)个/100倍镜,BaP②组(16.20士2.59)个/100倍镜,BaP③组(10.80±2.39)个/100倍镜,均P<0.01],BaP染毒组间成血管能力差异亦有统计学意义(两两比较,均P<0.05)}.同时细胞培养上清液中SOD的活力也呈BaP浓度依赖性地降低{正常对照组[(22.6±2.19) U/ml]高于BaP各组[BaP①组(15.94士1.68) U/ml,BaP②组(12.5士1.58)U/ml,BaP③组(6.9士1.55) U/ml,均P<0.01],BaP染毒组间SOD活力差异亦有统计学意义(两两比较,均P< 0.01)}.结论 BaP体外诱导显著影响EPC的多种生物学功能,其机制可能与氧化损伤有关.
目的 研究3,4苯併芘(BaP)對人臍血來源的內皮祖細胞(EPC)生物學功能的影響.方法 密度梯度離心法分離穫取人臍血單箇覈細胞,採用貼壁培養法培養MNC中的EPC,通過Dil標記的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)攝取實驗和FITC標記的植物凝集素(FITC-UEA-I lectin)結閤實驗鑒定細胞.消化收集第3代細胞,分彆採用細胞計數試劑盒(CCK-8)、黏附能力測定實驗、Transwell小室法及Matrigel體外成血管試驗觀察BaP對EPC增殖能力、黏附能力、遷移能力及成血管能力的影響,併檢測各組細胞培養上清液SOD含量.採用單因素方差分析及LSD-t檢驗進行統計學分析.結果 採用貼壁培養法能成功培養齣EPC;與正常對照組相比,BaP呈濃度依賴性降低EPC的增殖能力{正常對照組OD(1.02士0.04)顯著高于BaP各組[BaP①組OD (0.66士0.04),BaP②組OD (0.55±0.04),BaP③組OD (0.35±0.05),均P<0.01],BaP染毒組間增殖能力差異亦有統計學意義(兩兩比較,均P<0.01)};與正常對照組比較,BaP呈濃度依賴性降低EPC的黏附能力{正常對照組[(117.50士17.16)箇/200倍鏡]顯著高于BaP各組[BaP①組(80.00士14.46)箇/200倍鏡,BaP②組(66.00士9.06)箇/200倍鏡,BaP③組(49.80±10.72)箇/200倍鏡,均P<0.01],BaP染毒組間黏附能力差異亦有統計學意義(兩兩比較,均P<0.05)};與正常對照組相比,EPC的遷移能力亦呈BaP濃度依賴性降低{正常對照組[(46.10士4.51)箇/400倍鏡]顯著高于BaP各組[BaP①組(35.50士4.95)箇/400倍鏡,BaP②組(26.80士4.08)箇/400倍鏡,BaP③組(19.50±2.84)箇/400倍鏡,均P<0.01],BaP染毒組間遷移能力差異亦有統計學意義(兩兩比較,均P<0.01)};與正常對照組比較,EPC的成血管能力亦呈BaP濃度依賴性降低{正常對照組[(33.20士3.70)箇/100倍鏡]顯著高于BaP各組[BaP①組(22.00士3.39)箇/100倍鏡,BaP②組(16.20士2.59)箇/100倍鏡,BaP③組(10.80±2.39)箇/100倍鏡,均P<0.01],BaP染毒組間成血管能力差異亦有統計學意義(兩兩比較,均P<0.05)}.同時細胞培養上清液中SOD的活力也呈BaP濃度依賴性地降低{正常對照組[(22.6±2.19) U/ml]高于BaP各組[BaP①組(15.94士1.68) U/ml,BaP②組(12.5士1.58)U/ml,BaP③組(6.9士1.55) U/ml,均P<0.01],BaP染毒組間SOD活力差異亦有統計學意義(兩兩比較,均P< 0.01)}.結論 BaP體外誘導顯著影響EPC的多種生物學功能,其機製可能與氧化損傷有關.
목적 연구3,4분병비(BaP)대인제혈래원적내피조세포(EPC)생물학공능적영향.방법 밀도제도리심법분리획취인제혈단개핵세포,채용첩벽배양법배양MNC중적EPC,통과Dil표기적을선화저밀도지단백(Dil-ac-LDL)섭취실험화FITC표기적식물응집소(FITC-UEA-I lectin)결합실험감정세포.소화수집제3대세포,분별채용세포계수시제합(CCK-8)、점부능력측정실험、Transwell소실법급Matrigel체외성혈관시험관찰BaP대EPC증식능력、점부능력、천이능력급성혈관능력적영향,병검측각조세포배양상청액SOD함량.채용단인소방차분석급LSD-t검험진행통계학분석.결과 채용첩벽배양법능성공배양출EPC;여정상대조조상비,BaP정농도의뢰성강저EPC적증식능력{정상대조조OD(1.02사0.04)현저고우BaP각조[BaP①조OD (0.66사0.04),BaP②조OD (0.55±0.04),BaP③조OD (0.35±0.05),균P<0.01],BaP염독조간증식능력차이역유통계학의의(량량비교,균P<0.01)};여정상대조조비교,BaP정농도의뢰성강저EPC적점부능력{정상대조조[(117.50사17.16)개/200배경]현저고우BaP각조[BaP①조(80.00사14.46)개/200배경,BaP②조(66.00사9.06)개/200배경,BaP③조(49.80±10.72)개/200배경,균P<0.01],BaP염독조간점부능력차이역유통계학의의(량량비교,균P<0.05)};여정상대조조상비,EPC적천이능력역정BaP농도의뢰성강저{정상대조조[(46.10사4.51)개/400배경]현저고우BaP각조[BaP①조(35.50사4.95)개/400배경,BaP②조(26.80사4.08)개/400배경,BaP③조(19.50±2.84)개/400배경,균P<0.01],BaP염독조간천이능력차이역유통계학의의(량량비교,균P<0.01)};여정상대조조비교,EPC적성혈관능력역정BaP농도의뢰성강저{정상대조조[(33.20사3.70)개/100배경]현저고우BaP각조[BaP①조(22.00사3.39)개/100배경,BaP②조(16.20사2.59)개/100배경,BaP③조(10.80±2.39)개/100배경,균P<0.01],BaP염독조간성혈관능력차이역유통계학의의(량량비교,균P<0.05)}.동시세포배양상청액중SOD적활력야정BaP농도의뢰성지강저{정상대조조[(22.6±2.19) U/ml]고우BaP각조[BaP①조(15.94사1.68) U/ml,BaP②조(12.5사1.58)U/ml,BaP③조(6.9사1.55) U/ml,균P<0.01],BaP염독조간SOD활력차이역유통계학의의(량량비교,균P< 0.01)}.결론 BaP체외유도현저영향EPC적다충생물학공능,기궤제가능여양화손상유관.