实验动物科学
實驗動物科學
실험동물과학
LABORATORY ANIMAL SCIENCE
2013年
5期
28-32
,共5页
郭守利%张一飞%刘晔%朱大岭
郭守利%張一飛%劉曄%硃大嶺
곽수리%장일비%류엽%주대령
15-酮基二十碳四烯酸%肺动脉平滑肌细胞%细胞内Ca2+浓度
15-酮基二十碳四烯痠%肺動脈平滑肌細胞%細胞內Ca2+濃度
15-동기이십탄사희산%폐동맥평활기세포%세포내Ca2+농도
15-ketoeicosatetretraenoic acid%pulmonary arterial smooth cells%[Ca2 +] i
目的 探讨15-KETE对大鼠肺动脉平滑肌细胞内Ca2+的作用及其来源.方法 以酶法(胶原酶Ⅰ型和弹性酶)分离培养原代大鼠肺动脉平滑肌细胞,将细胞稀释所需密度(2×105个/mL),加样于6孔板中的盖玻片上,放入37℃孵箱中培养12 h,细胞贴壁后,取出6孔板中的盖玻片,放入特制的小槽内,D-Hanks液冲洗细胞3次,加入1×10-5moL/L的Flou-3/AM,置37℃孵箱中避光孵育约30 min,用D-Hanks液洗去细胞外残留染料,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,测定了15-KETE对大鼠肺动脉平滑肌细胞游离钙离子浓度的影响.结果 1)15-KETE(1×10-8-1×10-6) mol/L可依赖性引起肺动脉平滑肌细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)增加;2)1×10-6mol/L维拉帕米(L-型钙离子通道阻断剂)和无钙离子细胞外液显著阻抑了1×10-6 mol/L 15-KETE引起肺动脉平滑肌[Ca2+]i增加.结论 15-KETE可引起大鼠肺动脉平滑肌[Ca2+]i增加,并且此钙来源于细胞外液钙离子.
目的 探討15-KETE對大鼠肺動脈平滑肌細胞內Ca2+的作用及其來源.方法 以酶法(膠原酶Ⅰ型和彈性酶)分離培養原代大鼠肺動脈平滑肌細胞,將細胞稀釋所需密度(2×105箇/mL),加樣于6孔闆中的蓋玻片上,放入37℃孵箱中培養12 h,細胞貼壁後,取齣6孔闆中的蓋玻片,放入特製的小槽內,D-Hanks液遲洗細胞3次,加入1×10-5moL/L的Flou-3/AM,置37℃孵箱中避光孵育約30 min,用D-Hanks液洗去細胞外殘留染料,應用激光掃描共聚焦顯微鏡技術,測定瞭15-KETE對大鼠肺動脈平滑肌細胞遊離鈣離子濃度的影響.結果 1)15-KETE(1×10-8-1×10-6) mol/L可依賴性引起肺動脈平滑肌細胞內鈣離子濃度([Ca2+]i)增加;2)1×10-6mol/L維拉帕米(L-型鈣離子通道阻斷劑)和無鈣離子細胞外液顯著阻抑瞭1×10-6 mol/L 15-KETE引起肺動脈平滑肌[Ca2+]i增加.結論 15-KETE可引起大鼠肺動脈平滑肌[Ca2+]i增加,併且此鈣來源于細胞外液鈣離子.
목적 탐토15-KETE대대서폐동맥평활기세포내Ca2+적작용급기래원.방법 이매법(효원매Ⅰ형화탄성매)분리배양원대대서폐동맥평활기세포,장세포희석소수밀도(2×105개/mL),가양우6공판중적개파편상,방입37℃부상중배양12 h,세포첩벽후,취출6공판중적개파편,방입특제적소조내,D-Hanks액충세세포3차,가입1×10-5moL/L적Flou-3/AM,치37℃부상중피광부육약30 min,용D-Hanks액세거세포외잔류염료,응용격광소묘공취초현미경기술,측정료15-KETE대대서폐동맥평활기세포유리개리자농도적영향.결과 1)15-KETE(1×10-8-1×10-6) mol/L가의뢰성인기폐동맥평활기세포내개리자농도([Ca2+]i)증가;2)1×10-6mol/L유랍파미(L-형개리자통도조단제)화무개리자세포외액현저조억료1×10-6 mol/L 15-KETE인기폐동맥평활기[Ca2+]i증가.결론 15-KETE가인기대서폐동맥평활기[Ca2+]i증가,병차차개래원우세포외액개리자.
