中国草食动物科学
中國草食動物科學
중국초식동물과학
China Herbivores
2013年
6期
5-8
,共4页
陈晓勇%向海%O.H.D.Brahi%敦伟涛%赵兴波
陳曉勇%嚮海%O.H.D.Brahi%敦偉濤%趙興波
진효용%향해%O.H.D.Brahi%돈위도%조흥파
四引物扩增受阻突变体系PCR%绵羊%线粒体%单核苷酸多态性
四引物擴增受阻突變體繫PCR%綿羊%線粒體%單覈苷痠多態性
사인물확증수조돌변체계PCR%면양%선립체%단핵감산다태성
tetra-primer ARMS PCR%sheep%mitochondrion%SNP
为建立绵羊线粒体基因组SNP的四引物扩增受阻突变体系(tetra-primer amplification refractory mutation system,Tetra-primer ARMS)PCR检测方法,选择小尾寒羊线粒体T1112C和C11606T2个SNP,在等位基因特异PCR基础上,根据错配原理设计4条引物,优化PCR反应体系,采用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物.结果表明:T1112C位点检测中,所有个体均能扩增出569 bp最长片段的外引物产物(阳性对照),扩增出349 bp片段的个体为野生型,扩增出263 bp片段的个体为突变型.C11606T位点检测中,所有个体均能扩增出572 bp最长片段的外引物产物(阳性对照),扩增出408 bp片段的个体为野生型,扩增出213 bp片段的个体为突变型.在每个线粒体多态位点均检测到野生型和突变型2种基因型,没有发现异质性.应用Tetra-primer ARMS PCR方法,经一次PCR即可判定线粒体SNP位点的基因型,该方法快速、简便,可应用于绵羊线粒体SNP分型.
為建立綿羊線粒體基因組SNP的四引物擴增受阻突變體繫(tetra-primer amplification refractory mutation system,Tetra-primer ARMS)PCR檢測方法,選擇小尾寒羊線粒體T1112C和C11606T2箇SNP,在等位基因特異PCR基礎上,根據錯配原理設計4條引物,優化PCR反應體繫,採用瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產物.結果錶明:T1112C位點檢測中,所有箇體均能擴增齣569 bp最長片段的外引物產物(暘性對照),擴增齣349 bp片段的箇體為野生型,擴增齣263 bp片段的箇體為突變型.C11606T位點檢測中,所有箇體均能擴增齣572 bp最長片段的外引物產物(暘性對照),擴增齣408 bp片段的箇體為野生型,擴增齣213 bp片段的箇體為突變型.在每箇線粒體多態位點均檢測到野生型和突變型2種基因型,沒有髮現異質性.應用Tetra-primer ARMS PCR方法,經一次PCR即可判定線粒體SNP位點的基因型,該方法快速、簡便,可應用于綿羊線粒體SNP分型.
위건립면양선립체기인조SNP적사인물확증수조돌변체계(tetra-primer amplification refractory mutation system,Tetra-primer ARMS)PCR검측방법,선택소미한양선립체T1112C화C11606T2개SNP,재등위기인특이PCR기출상,근거착배원리설계4조인물,우화PCR반응체계,채용경지당응효전영검측PCR산물.결과표명:T1112C위점검측중,소유개체균능확증출569 bp최장편단적외인물산물(양성대조),확증출349 bp편단적개체위야생형,확증출263 bp편단적개체위돌변형.C11606T위점검측중,소유개체균능확증출572 bp최장편단적외인물산물(양성대조),확증출408 bp편단적개체위야생형,확증출213 bp편단적개체위돌변형.재매개선립체다태위점균검측도야생형화돌변형2충기인형,몰유발현이질성.응용Tetra-primer ARMS PCR방법,경일차PCR즉가판정선립체SNP위점적기인형,해방법쾌속、간편,가응용우면양선립체SNP분형.
