广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
19期
2922-2925
,共4页
刘燕%朱丽艳%彭海兵%王银环%周洪霞%张连元
劉燕%硃麗豔%彭海兵%王銀環%週洪霞%張連元
류연%주려염%팽해병%왕은배%주홍하%장련원
再灌注损伤%缺血预适应%骨骼肌%一氧化氮%凋亡
再灌註損傷%缺血預適應%骨骼肌%一氧化氮%凋亡
재관주손상%결혈예괄응%골격기%일양화담%조망
ischemia-reperfusion%ischemic preconditioning%skeletal muscle%nitrogen monoxide%apoptosis
目的 观察缺血预适应对肢体缺血再灌注后骨骼肌损伤的保护效应,探讨一氧化氮(NO)在该过程中的作用.方法 雄性Wistar大鼠32只,随机分为4组(n=8):假手术组仅进行假手术,双后肢松弛环绕橡皮圈,不阻断血流;再灌注组结扎大鼠双后肢根部4h,恢复血流灌注4h;预适应组预先阻断双后肢血流5 min,恢复血流灌注5 min,反复4次,其后进行缺血再灌注;Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)处理组松带前15 min给予L-NAME 10 mg/kg,其他操作同预适应组.观察各组血浆NO、内皮素-1(ET-1)及NO/ET-1比值的变化;观察骨骼肌组织中NO、ET-1、NO/ET-1比值、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、DNA双链百分率的改变,采用免疫组织化学方法检测腓肠肌组织中凋亡相关基因Bcl-2、Bax和凋亡蛋白酶Caspase-3的蛋白表达情况,利用原位脱氧核糖核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测各组腓肠肌细胞的凋亡情况.结果 再灌注组与假手术组比较,血浆及腓肠肌组织NO、ET-1含量明显升高,NO/ET-1比值减小,腓肠肌组织MDA、MPO含量升高,DNA双链百分率值降低,Bcl-2/Bax比值减小,Caspase-3蛋白表达明显上调.凋亡指数(AI)明显升高(P＜0.01).预适应组与再灌注组比较,血浆及腓肠肌组织NO含量升高,ET-1下降,NO/ET-1比值升高;腓肠肌组织MDA、MPO含量下降,DNA双链百分率值升高,Bcl-2/Bax比值升高,Caspase-3蛋白表达水平明显减弱,AI下降(P＜0.01).L-NAME处理组与预适应组比较,血浆及骨骼肌NO含量明显下降,NO/ET-1比值减小,腓肠肌组织MDA、MPO含量升高,DNA双链百分率值降低,Bcl-2/Bax比值减小,Caspase-3蛋白表达明显上调.AI明显升高(P＜0.01).结论 缺血预适应可明显改善肢体缺血再灌注后骨骼肌组织损伤及凋亡,NO参与缺血预适应的保护效应.
目的 觀察缺血預適應對肢體缺血再灌註後骨骼肌損傷的保護效應,探討一氧化氮(NO)在該過程中的作用.方法 雄性Wistar大鼠32隻,隨機分為4組(n=8):假手術組僅進行假手術,雙後肢鬆弛環繞橡皮圈,不阻斷血流;再灌註組結扎大鼠雙後肢根部4h,恢複血流灌註4h;預適應組預先阻斷雙後肢血流5 min,恢複血流灌註5 min,反複4次,其後進行缺血再灌註;Nω-硝基-L-精氨痠甲酯(L-NAME)處理組鬆帶前15 min給予L-NAME 10 mg/kg,其他操作同預適應組.觀察各組血漿NO、內皮素-1(ET-1)及NO/ET-1比值的變化;觀察骨骼肌組織中NO、ET-1、NO/ET-1比值、丙二醛(MDA)、髓過氧化物酶(MPO)、DNA雙鏈百分率的改變,採用免疫組織化學方法檢測腓腸肌組織中凋亡相關基因Bcl-2、Bax和凋亡蛋白酶Caspase-3的蛋白錶達情況,利用原位脫氧覈糖覈甘痠末耑轉移酶介導的缺口末耑標記法檢測各組腓腸肌細胞的凋亡情況.結果 再灌註組與假手術組比較,血漿及腓腸肌組織NO、ET-1含量明顯升高,NO/ET-1比值減小,腓腸肌組織MDA、MPO含量升高,DNA雙鏈百分率值降低,Bcl-2/Bax比值減小,Caspase-3蛋白錶達明顯上調.凋亡指數(AI)明顯升高(P＜0.01).預適應組與再灌註組比較,血漿及腓腸肌組織NO含量升高,ET-1下降,NO/ET-1比值升高;腓腸肌組織MDA、MPO含量下降,DNA雙鏈百分率值升高,Bcl-2/Bax比值升高,Caspase-3蛋白錶達水平明顯減弱,AI下降(P＜0.01).L-NAME處理組與預適應組比較,血漿及骨骼肌NO含量明顯下降,NO/ET-1比值減小,腓腸肌組織MDA、MPO含量升高,DNA雙鏈百分率值降低,Bcl-2/Bax比值減小,Caspase-3蛋白錶達明顯上調.AI明顯升高(P＜0.01).結論 缺血預適應可明顯改善肢體缺血再灌註後骨骼肌組織損傷及凋亡,NO參與缺血預適應的保護效應.
목적 관찰결혈예괄응대지체결혈재관주후골격기손상적보호효응,탐토일양화담(NO)재해과정중적작용.방법 웅성Wistar대서32지,수궤분위4조(n=8):가수술조부진행가수술,쌍후지송이배요상피권,불조단혈류;재관주조결찰대서쌍후지근부4h,회복혈류관주4h;예괄응조예선조단쌍후지혈류5 min,회복혈류관주5 min,반복4차,기후진행결혈재관주;Nω-초기-L-정안산갑지(L-NAME)처리조송대전15 min급여L-NAME 10 mg/kg,기타조작동예괄응조.관찰각조혈장NO、내피소-1(ET-1)급NO/ET-1비치적변화;관찰골격기조직중NO、ET-1、NO/ET-1비치、병이철(MDA)、수과양화물매(MPO)、DNA쌍련백분솔적개변,채용면역조직화학방법검측비장기조직중조망상관기인Bcl-2、Bax화조망단백매Caspase-3적단백표체정황,이용원위탈양핵당핵감산말단전이매개도적결구말단표기법검측각조비장기세포적조망정황.결과 재관주조여가수술조비교,혈장급비장기조직NO、ET-1함량명현승고,NO/ET-1비치감소,비장기조직MDA、MPO함량승고,DNA쌍련백분솔치강저,Bcl-2/Bax비치감소,Caspase-3단백표체명현상조.조망지수(AI)명현승고(P＜0.01).예괄응조여재관주조비교,혈장급비장기조직NO함량승고,ET-1하강,NO/ET-1비치승고;비장기조직MDA、MPO함량하강,DNA쌍련백분솔치승고,Bcl-2/Bax비치승고,Caspase-3단백표체수평명현감약,AI하강(P＜0.01).L-NAME처리조여예괄응조비교,혈장급골격기NO함량명현하강,NO/ET-1비치감소,비장기조직MDA、MPO함량승고,DNA쌍련백분솔치강저,Bcl-2/Bax비치감소,Caspase-3단백표체명현상조.AI명현승고(P＜0.01).결론 결혈예괄응가명현개선지체결혈재관주후골격기조직손상급조망,NO삼여결혈예괄응적보호효응.
