山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2014年
22期
29-31
,共3页
姚帅辉%钟德君%康敏%廖烨辉%张毅
姚帥輝%鐘德君%康敏%廖燁輝%張毅
요수휘%종덕군%강민%료엽휘%장의
全反式维甲酸%神经干细胞%胶质细胞源性神经营养因子%脊髓损伤%移植
全反式維甲痠%神經榦細胞%膠質細胞源性神經營養因子%脊髓損傷%移植
전반식유갑산%신경간세포%효질세포원성신경영양인자%척수손상%이식
目的:体外应用全反式维甲酸(ATRA)进行干预培养的鼠胚神经干细胞(NSCs)联合胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)移植至大鼠损伤脊髓,探讨其对脊髓损伤再生修复的效果。方法体外应用ATRA 1.0μmol/L浓度下诱导NSCs,将60只雌性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、损伤对照组、ATRA干预组、GDNF组、ATRA+GDNF组,每组10只。损伤对照组、ATRA干预组、ATRA+GDNF组、GDNF组大鼠行胸段脊髓全横断损伤效果。术后于移植前1 d、移植后1、2、5、8周,评估大鼠双后肢运动功能,测定运动诱发电位(MEP)评估神经传导功能,采用免疫荧光染色观察移植后NSCs存活情况,5-溴脱氧尿嘧啶核苷/胶质纤维酸性蛋白(BrdU/GFAP)免疫荧光双标染色观察星形胶质细胞分化情况,5-溴脱氧尿嘧啶核苷/微管相关蛋白-2(BrdU/MAP-2)免疫荧光双标染色观察神经元分化情况。评估轴突生长情况。结果8周后ATRA+GDNF组大鼠行为学评分高于其他各组(P<0.01)。与ATRA干预组及GDNF组相比,8周后ATRA+GDNF组脊髓内GFAP、MAP-2阳性细胞表达面积增大(P<0.05);移植的NSCs在受损脊髓内存活并向周围迁移,后肢运动功能较对照组及ATRA干预组、GDNF组明显改善。结论体外ATRA干预的NSCs联合GDNF移植可有效补充缺失的神经细胞,改善脊髓内微环境,对大鼠后肢功能的改善优于单一应用细胞或神经营养因子移植。
目的:體外應用全反式維甲痠(ATRA)進行榦預培養的鼠胚神經榦細胞(NSCs)聯閤膠質細胞源性神經營養因子(GDNF)移植至大鼠損傷脊髓,探討其對脊髓損傷再生脩複的效果。方法體外應用ATRA 1.0μmol/L濃度下誘導NSCs,將60隻雌性SD大鼠隨機分為正常組、假手術組、損傷對照組、ATRA榦預組、GDNF組、ATRA+GDNF組,每組10隻。損傷對照組、ATRA榦預組、ATRA+GDNF組、GDNF組大鼠行胸段脊髓全橫斷損傷效果。術後于移植前1 d、移植後1、2、5、8週,評估大鼠雙後肢運動功能,測定運動誘髮電位(MEP)評估神經傳導功能,採用免疫熒光染色觀察移植後NSCs存活情況,5-溴脫氧尿嘧啶覈苷/膠質纖維痠性蛋白(BrdU/GFAP)免疫熒光雙標染色觀察星形膠質細胞分化情況,5-溴脫氧尿嘧啶覈苷/微管相關蛋白-2(BrdU/MAP-2)免疫熒光雙標染色觀察神經元分化情況。評估軸突生長情況。結果8週後ATRA+GDNF組大鼠行為學評分高于其他各組(P<0.01)。與ATRA榦預組及GDNF組相比,8週後ATRA+GDNF組脊髓內GFAP、MAP-2暘性細胞錶達麵積增大(P<0.05);移植的NSCs在受損脊髓內存活併嚮週圍遷移,後肢運動功能較對照組及ATRA榦預組、GDNF組明顯改善。結論體外ATRA榦預的NSCs聯閤GDNF移植可有效補充缺失的神經細胞,改善脊髓內微環境,對大鼠後肢功能的改善優于單一應用細胞或神經營養因子移植。
목적:체외응용전반식유갑산(ATRA)진행간예배양적서배신경간세포(NSCs)연합효질세포원성신경영양인자(GDNF)이식지대서손상척수,탐토기대척수손상재생수복적효과。방법체외응용ATRA 1.0μmol/L농도하유도NSCs,장60지자성SD대서수궤분위정상조、가수술조、손상대조조、ATRA간예조、GDNF조、ATRA+GDNF조,매조10지。손상대조조、ATRA간예조、ATRA+GDNF조、GDNF조대서행흉단척수전횡단손상효과。술후우이식전1 d、이식후1、2、5、8주,평고대서쌍후지운동공능,측정운동유발전위(MEP)평고신경전도공능,채용면역형광염색관찰이식후NSCs존활정황,5-추탈양뇨밀정핵감/효질섬유산성단백(BrdU/GFAP)면역형광쌍표염색관찰성형효질세포분화정황,5-추탈양뇨밀정핵감/미관상관단백-2(BrdU/MAP-2)면역형광쌍표염색관찰신경원분화정황。평고축돌생장정황。결과8주후ATRA+GDNF조대서행위학평분고우기타각조(P<0.01)。여ATRA간예조급GDNF조상비,8주후ATRA+GDNF조척수내GFAP、MAP-2양성세포표체면적증대(P<0.05);이식적NSCs재수손척수내존활병향주위천이,후지운동공능교대조조급ATRA간예조、GDNF조명현개선。결론체외ATRA간예적NSCs연합GDNF이식가유효보충결실적신경세포,개선척수내미배경,대대서후지공능적개선우우단일응용세포혹신경영양인자이식。