作物研究
作物研究
작물연구
CROP RESEARCH
2014年
5期
533-536
,共4页
冯光惠%杜虎平%李夏隆%亢福仁
馮光惠%杜虎平%李夏隆%亢福仁
풍광혜%두호평%리하륭%항복인
马铃薯%纺锤块茎类病毒%RT-PCR检测%序列分析
馬鈴藷%紡錘塊莖類病毒%RT-PCR檢測%序列分析
마령서%방추괴경류병독%RT-PCR검측%서렬분석
以陕西省延安地区8个乡镇种植2~3代的马铃薯叶片为材料,Trizol法提取马铃薯叶片总RNA,以已公布的马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)基因序列设计合成特异引物,反转录合成cDNA,RT-PCR扩增目的基因片段并电泳检测,回收纯化目的片段,然后进行克隆和测序,采用DNAstar软件分析序列一致性。结果显示:在马铃薯叶片中均扩增到与预期大小一致的目的片段,表明这些乡镇的马铃薯均感染了PSTVd,8个采样点PSTVd的目的片段大小为247~251 bp,出现少量碱基的突变或缺失,说明PSTVd在延安地区部分乡镇发生了一定程度的变异,与国内外其他14个地区之间的序列一致性为80.4%~99.2%。
以陝西省延安地區8箇鄉鎮種植2~3代的馬鈴藷葉片為材料,Trizol法提取馬鈴藷葉片總RNA,以已公佈的馬鈴藷紡錘塊莖類病毒(PSTVd)基因序列設計閤成特異引物,反轉錄閤成cDNA,RT-PCR擴增目的基因片段併電泳檢測,迴收純化目的片段,然後進行剋隆和測序,採用DNAstar軟件分析序列一緻性。結果顯示:在馬鈴藷葉片中均擴增到與預期大小一緻的目的片段,錶明這些鄉鎮的馬鈴藷均感染瞭PSTVd,8箇採樣點PSTVd的目的片段大小為247~251 bp,齣現少量堿基的突變或缺失,說明PSTVd在延安地區部分鄉鎮髮生瞭一定程度的變異,與國內外其他14箇地區之間的序列一緻性為80.4%~99.2%。
이합서성연안지구8개향진충식2~3대적마령서협편위재료,Trizol법제취마령서협편총RNA,이이공포적마령서방추괴경류병독(PSTVd)기인서렬설계합성특이인물,반전록합성cDNA,RT-PCR확증목적기인편단병전영검측,회수순화목적편단,연후진행극륭화측서,채용DNAstar연건분석서렬일치성。결과현시:재마령서협편중균확증도여예기대소일치적목적편단,표명저사향진적마령서균감염료PSTVd,8개채양점PSTVd적목적편단대소위247~251 bp,출현소량감기적돌변혹결실,설명PSTVd재연안지구부분향진발생료일정정도적변이,여국내외기타14개지구지간적서렬일치성위80.4%~99.2%。