CAJ | 학술논문

目的:利用现代分子生物学方法,建立一种准确率更高的犬疥(璊)病的诊断方法,为犬疥(璊)病的治疗提供诊断基础.方法:收集犬疥(璊),抽提总RNA并将其反转录为cDNA;以该cDNA为模板,参考其它哺乳动物副肌球蛋白的基因序列特征,设计引物扩增含有多个抗原表位的犬副肌球蛋白的部分cDNA序列;构建原核表达载体,表达及纯化目的蛋白片段;以纯化的目的蛋白片段为抗原,免疫BALB/c小鼠制备抗血清;以制备的抗血清为一抗,通过间接ELISA法测定患病犬痂皮组织中疥(璊)副肌球蛋白片段的存在,进而判断是否有疥(璊)感染.结果:成功构建了副肌球蛋白的原核表达载体,命名为pET28a-Para-202;通过诱导、纯化获得了重组蛋白;该重组蛋白抗原免疫小鼠后获得高效价的抗血清;以该抗血清为工具,通过间接ELISA法极大提高了犬疥(璊)感染的诊断率,为该病治疗提供了重要的参考依据.
목적:이용현대분자생물학방법,건립일충준학솔경고적견개(문)병적진단방법,위견개(문)병적치료제공진단기출.방법:수집견개(문),추제총RNA병장기반전록위cDNA;이해cDNA위모판,삼고기타포유동물부기구단백적기인서렬특정,설계인물확증함유다개항원표위적견부기구단백적부분cDNA서렬;구건원핵표체재체,표체급순화목적단백편단;이순화적목적단백편단위항원,면역BALB/c소서제비항혈청;이제비적항혈청위일항,통과간접ELISA법측정환병견가피조직중개(문)부기구단백편단적존재,진이판단시부유개(문)감염.결과:성공구건료부기구단백적원핵표체재체,명명위pET28a-Para-202;통과유도、순화획득료중조단백;해중조단백항원면역소서후획득고효개적항혈청;이해항혈청위공구,통과간접ELISA법겁대제고료견개(문)감염적진단솔,위해병치료제공료중요적삼고의거.