中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
7期
589-591
,共3页
胡卫杰%王伟%孙建华%邓瑞坡%张雅春%尹海畅%孟庆文
鬍衛傑%王偉%孫建華%鄧瑞坡%張雅春%尹海暢%孟慶文
호위걸%왕위%손건화%산서파%장아춘%윤해창%맹경문
鸡%Mx蛋白%单克隆抗体
鷄%Mx蛋白%單剋隆抗體
계%Mx단백%단극륭항체
chicken%Mx protein%monoclonal antibody
Mx蛋白为GTP酶动态蛋白家族成员,已被证明具有抗禽流感病毒、Thogoto病毒和水泡性口膜炎病毒等的作用.为制备鸡Mx蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的鸡Mx蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞与SP2/0细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性克隆,经3次细胞克隆纯化后获得4株稳定分泌抗鸡Mx蛋白抗体的杂交瘤细胞株.间接ELISA测定4株MAb纯化后腹水的效价介于1∶3.2×104～1∶2.5×105之间.Westem blot结果证实4株MAb均具有良好的反应性；间接免疫荧光试验表明其中一株MAb与真核表达的鸡Mx蛋白发生反应.本研究为鸡Mx蛋白功能及表达鸡Mx蛋白的转基因动物等研究奠定了基础.
Mx蛋白為GTP酶動態蛋白傢族成員,已被證明具有抗禽流感病毒、Thogoto病毒和水泡性口膜炎病毒等的作用.為製備鷄Mx蛋白的單剋隆抗體(MAb),本研究以原覈錶達併純化的鷄Mx蛋白為免疫原,免疫BALB/c小鼠,分離脾細胞與SP2/0細胞融閤,採用間接ELISA方法篩選暘性剋隆,經3次細胞剋隆純化後穫得4株穩定分泌抗鷄Mx蛋白抗體的雜交瘤細胞株.間接ELISA測定4株MAb純化後腹水的效價介于1∶3.2×104～1∶2.5×105之間.Westem blot結果證實4株MAb均具有良好的反應性；間接免疫熒光試驗錶明其中一株MAb與真覈錶達的鷄Mx蛋白髮生反應.本研究為鷄Mx蛋白功能及錶達鷄Mx蛋白的轉基因動物等研究奠定瞭基礎.
Mx단백위GTP매동태단백가족성원,이피증명구유항금류감병독、Thogoto병독화수포성구막염병독등적작용.위제비계Mx단백적단극륭항체(MAb),본연구이원핵표체병순화적계Mx단백위면역원,면역BALB/c소서,분리비세포여SP2/0세포융합,채용간접ELISA방법사선양성극륭,경3차세포극륭순화후획득4주은정분비항계Mx단백항체적잡교류세포주.간접ELISA측정4주MAb순화후복수적효개개우1∶3.2×104～1∶2.5×105지간.Westem blot결과증실4주MAb균구유량호적반응성；간접면역형광시험표명기중일주MAb여진핵표체적계Mx단백발생반응.본연구위계Mx단백공능급표체계Mx단백적전기인동물등연구전정료기출.
