昆明医科大学学报
昆明醫科大學學報
곤명의과대학학보
Journal of Kunming Medical University
2014年
6期
23-28
,共6页
改良贴壁组织块法%改良Ⅰ型胶原酶消法%髁突%成骨细胞%增殖%细胞周期
改良貼壁組織塊法%改良Ⅰ型膠原酶消法%髁突%成骨細胞%增殖%細胞週期
개량첩벽조직괴법%개량Ⅰ형효원매소법%과돌%성골세포%증식%세포주기
Improved tissue explants adherent method%Improved type-Ⅰ collagen enzyme digestion method%Temporal mandibular joint%Osteoblast%Proliferation%Cell cycle
目的 比较改良贴壁组织块法与改良Ⅰ型胶原酶消法对SD大鼠颞下颌关节髁突软骨下骨成骨细胞的增殖效果.方法 取10只出生1 ～3dSD乳鼠颞下颌关节髁突软骨下骨,将骨片平分成2份,分别采用改良贴壁组织块法和改良Ⅰ型胶原酶消法培养颞下颌关节髁突成骨细胞,并标记为Ⅰ组和Ⅱ组,通过细胞形态学观察、HE染色、ALP染色鉴定成骨细胞.取第4代成骨细胞进行细胞计数、MTT生长曲线及流式细胞仪周期分析,比较2种原代培养方法对成骨细胞增殖能力的异同.结果 (1)Ⅰ组和Ⅱ组培养的细胞经鉴定均为成骨细胞; (2) Ⅱ组成骨细胞总量约为Ⅰ组细胞总量的1.5倍; (3) Ⅱ组成骨细胞MTT生长曲线较Ⅰ组细胞提前2d进入对数生长期及达到生长高峰; (4)2组细胞在达到第4代时,细胞周期含量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 改良贴壁组织块法和改良Ⅰ型胶原酶消化法均适用于颞下颌关节软骨下骨成骨细胞的培养,但改良Ⅰ型胶原酶消化法可以更快速有效地获得大量成骨细胞.
目的 比較改良貼壁組織塊法與改良Ⅰ型膠原酶消法對SD大鼠顳下頜關節髁突軟骨下骨成骨細胞的增殖效果.方法 取10隻齣生1 ～3dSD乳鼠顳下頜關節髁突軟骨下骨,將骨片平分成2份,分彆採用改良貼壁組織塊法和改良Ⅰ型膠原酶消法培養顳下頜關節髁突成骨細胞,併標記為Ⅰ組和Ⅱ組,通過細胞形態學觀察、HE染色、ALP染色鑒定成骨細胞.取第4代成骨細胞進行細胞計數、MTT生長麯線及流式細胞儀週期分析,比較2種原代培養方法對成骨細胞增殖能力的異同.結果 (1)Ⅰ組和Ⅱ組培養的細胞經鑒定均為成骨細胞; (2) Ⅱ組成骨細胞總量約為Ⅰ組細胞總量的1.5倍; (3) Ⅱ組成骨細胞MTT生長麯線較Ⅰ組細胞提前2d進入對數生長期及達到生長高峰; (4)2組細胞在達到第4代時,細胞週期含量差異無統計學意義(P＞0.05).結論 改良貼壁組織塊法和改良Ⅰ型膠原酶消化法均適用于顳下頜關節軟骨下骨成骨細胞的培養,但改良Ⅰ型膠原酶消化法可以更快速有效地穫得大量成骨細胞.
목적 비교개량첩벽조직괴법여개량Ⅰ형효원매소법대SD대서섭하합관절과돌연골하골성골세포적증식효과.방법 취10지출생1 ～3dSD유서섭하합관절과돌연골하골,장골편평분성2빈,분별채용개량첩벽조직괴법화개량Ⅰ형효원매소법배양섭하합관절과돌성골세포,병표기위Ⅰ조화Ⅱ조,통과세포형태학관찰、HE염색、ALP염색감정성골세포.취제4대성골세포진행세포계수、MTT생장곡선급류식세포의주기분석,비교2충원대배양방법대성골세포증식능력적이동.결과 (1)Ⅰ조화Ⅱ조배양적세포경감정균위성골세포; (2) Ⅱ조성골세포총량약위Ⅰ조세포총량적1.5배; (3) Ⅱ조성골세포MTT생장곡선교Ⅰ조세포제전2d진입대수생장기급체도생장고봉; (4)2조세포재체도제4대시,세포주기함량차이무통계학의의(P＞0.05).결론 개량첩벽조직괴법화개량Ⅰ형효원매소화법균괄용우섭하합관절연골하골성골세포적배양,단개량Ⅰ형효원매소화법가이경쾌속유효지획득대량성골세포.
