山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
42期
1-4,8
,共5页
张禾璇%何燕%张婷%王婵娟%单可人%官志忠
張禾璇%何燕%張婷%王嬋娟%單可人%官誌忠
장화선%하연%장정%왕선연%단가인%관지충
电转染%HepG2细胞%转染效率%pcDNA3.1-EGFP
電轉染%HepG2細胞%轉染效率%pcDNA3.1-EGFP
전전염%HepG2세포%전염효솔%pcDNA3.1-EGFP
electransfection%HepG2 cells%transfection efficiency%pcDNA3.1-EGFP
目的 优化HepG2细胞电转染条件,进一步提高HepG2细胞的转染效率.方法 采用电穿孔方法将pcDNA3.1-EGFP导入HepG2细胞中,在500 μL电转染体系中,在不同电场强度、细胞数目、脉冲频率、脉冲时间、电转质粒数目、电转缓冲液、培养基血清浓度条件下,分别将pcDNA3.1-EGFP质粒电转染HepG2细胞,检测不同条件下细胞存活率和转染率.结果 电转前4℃孵育电转体系混合液10 min,方波电转条件在1个电脉冲、电压270V、细胞数为2×106个、质粒20 μg、脉冲时间20 ms、电转缓冲液为优化缓冲液、电转后置于37℃、含15％ FBS的DMEM高糖培养基中培养48 h,可获得高转染率(60.68±1.87)％.结论 优化电穿孔法的电转染条件能够有效提高HepG2细胞的电转染效率.本研究为外源基因电转染HepG2细胞提供了可靠的试验参数.
目的 優化HepG2細胞電轉染條件,進一步提高HepG2細胞的轉染效率.方法 採用電穿孔方法將pcDNA3.1-EGFP導入HepG2細胞中,在500 μL電轉染體繫中,在不同電場彊度、細胞數目、脈遲頻率、脈遲時間、電轉質粒數目、電轉緩遲液、培養基血清濃度條件下,分彆將pcDNA3.1-EGFP質粒電轉染HepG2細胞,檢測不同條件下細胞存活率和轉染率.結果 電轉前4℃孵育電轉體繫混閤液10 min,方波電轉條件在1箇電脈遲、電壓270V、細胞數為2×106箇、質粒20 μg、脈遲時間20 ms、電轉緩遲液為優化緩遲液、電轉後置于37℃、含15％ FBS的DMEM高糖培養基中培養48 h,可穫得高轉染率(60.68±1.87)％.結論 優化電穿孔法的電轉染條件能夠有效提高HepG2細胞的電轉染效率.本研究為外源基因電轉染HepG2細胞提供瞭可靠的試驗參數.
목적 우화HepG2세포전전염조건,진일보제고HepG2세포적전염효솔.방법 채용전천공방법장pcDNA3.1-EGFP도입HepG2세포중,재500 μL전전염체계중,재불동전장강도、세포수목、맥충빈솔、맥충시간、전전질립수목、전전완충액、배양기혈청농도조건하,분별장pcDNA3.1-EGFP질립전전염HepG2세포,검측불동조건하세포존활솔화전염솔.결과 전전전4℃부육전전체계혼합액10 min,방파전전조건재1개전맥충、전압270V、세포수위2×106개、질립20 μg、맥충시간20 ms、전전완충액위우화완충액、전전후치우37℃、함15％ FBS적DMEM고당배양기중배양48 h,가획득고전염솔(60.68±1.87)％.결론 우화전천공법적전전염조건능구유효제고HepG2세포적전전염효솔.본연구위외원기인전전염HepG2세포제공료가고적시험삼수.
