草业学报
草業學報
초업학보
PRATACULTURAL SCIENCE
2012年
6期
182-189
,共8页
李燕%孙彦%杨青川%康俊梅%张铁军%房锋
李燕%孫彥%楊青川%康俊梅%張鐵軍%房鋒
리연%손언%양청천%강준매%장철군%방봉
紫花苜蓿%MsZIP基因%超表达载体%苜蓿转化%转基因苜蓿检测
紫花苜蓿%MsZIP基因%超錶達載體%苜蓿轉化%轉基因苜蓿檢測
자화목숙%MsZIP기인%초표체재체%목숙전화%전기인목숙검측
根据已经克隆得到的MsZIP基因(GenBank序列号:HQ911778),扩增编码区cDNA,构建植物超表达载体PBI-MsZIP.酶切鉴定表明,目的基因已经正确的插入到载体中,超表达载体构建成功.采用CaCl2冻融法将其转入农杆菌菌株中,然后采用农杆菌介导的方法,转化紫花苜蓿,共得到11株抗性苗,对其中的4株进行卡那霉素基因PCR检测,均得到了目的条带.同时对这4株抗性苗进行目的基因的RT-PCR检测,均得到了目的条带.说明MsZIP基因已经成功在苜蓿中超表达.为了进一步验证该基因的功能,分别用200 mmol/L NaCl和25μmol/LPEG-6000处理转基因苜蓿,3d后进行生理指标的测定.结果表明,MsZIP基因在苜蓿中超表达可以提高苜蓿的耐盐性和耐旱性.
根據已經剋隆得到的MsZIP基因(GenBank序列號:HQ911778),擴增編碼區cDNA,構建植物超錶達載體PBI-MsZIP.酶切鑒定錶明,目的基因已經正確的插入到載體中,超錶達載體構建成功.採用CaCl2凍融法將其轉入農桿菌菌株中,然後採用農桿菌介導的方法,轉化紫花苜蓿,共得到11株抗性苗,對其中的4株進行卡那黴素基因PCR檢測,均得到瞭目的條帶.同時對這4株抗性苗進行目的基因的RT-PCR檢測,均得到瞭目的條帶.說明MsZIP基因已經成功在苜蓿中超錶達.為瞭進一步驗證該基因的功能,分彆用200 mmol/L NaCl和25μmol/LPEG-6000處理轉基因苜蓿,3d後進行生理指標的測定.結果錶明,MsZIP基因在苜蓿中超錶達可以提高苜蓿的耐鹽性和耐旱性.
근거이경극륭득도적MsZIP기인(GenBank서렬호:HQ911778),확증편마구cDNA,구건식물초표체재체PBI-MsZIP.매절감정표명,목적기인이경정학적삽입도재체중,초표체재체구건성공.채용CaCl2동융법장기전입농간균균주중,연후채용농간균개도적방법,전화자화목숙,공득도11주항성묘,대기중적4주진행잡나매소기인PCR검측,균득도료목적조대.동시대저4주항성묘진행목적기인적RT-PCR검측,균득도료목적조대.설명MsZIP기인이경성공재목숙중초표체.위료진일보험증해기인적공능,분별용200 mmol/L NaCl화25μmol/LPEG-6000처리전기인목숙,3d후진행생리지표적측정.결과표명,MsZIP기인재목숙중초표체가이제고목숙적내염성화내한성.
