生殖医学杂志
生殖醫學雜誌
생식의학잡지
JOURNAL OF REPRODUCTIVE MEDICINE
2014年
5期
393-400
,共8页
金晓艳%蒋玥%山惠枝%张慧%颜桂军%孙海翔
金曉豔%蔣玥%山惠枝%張慧%顏桂軍%孫海翔
금효염%장모%산혜지%장혜%안계군%손해상
KLF12%胰岛素样生长因子结合蛋白-1%子宫内膜间质细胞%蜕膜化
KLF12%胰島素樣生長因子結閤蛋白-1%子宮內膜間質細胞%蛻膜化
KLF12%이도소양생장인자결합단백-1%자궁내막간질세포%세막화
KLF12%IGFBP-1%Human endometrial stromal cells%Decidualization
目的 人子宫内膜间质细胞蜕膜化标志蛋白胰岛素样生长因子结合蛋白-1 (insulin-like growth factor binding protein-1,IGFBP-1)参与调控月经周期、排卵、蜕膜化、胚胎种植以及胎儿生长等生理过程,本研究旨在探索锌指蛋白KLF12对人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP 1表达的影响.方法 制备Ad Flag KLF12重组腺病毒,通过荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)结合重组腺病毒介导的KLF12过表达实验,阐述人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中KLF12对IGFBP 1表达调控作用.结果 成功获得滴度为2×1011 ifu/ml的重组KLF12腺病毒,该腺病毒可在人子宫内膜间质细胞中高表达Flag KLF12融合蛋白;体外分离培养的人子宫内膜间质细胞经8 Br cAMP和醋酸甲羟孕酮(medroxy progesterone acetate,MPA)联合诱导蜕膜化后,KLF12的mRNA表达随着诱导时间延长逐渐降低,72 h降低最明显,较未刺激降低约70％;过表达KLF12显著抑制8 Br cAMP和MPA诱导的人子宫内膜间质细胞中IGFBP 1 mRNA的表达,并以时间依赖的方式明显抑制IGFBP 1的分泌(P＜0.01);过表达KLF12明显抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP 1启动子转录活性.结论 锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP 1的表达与分泌.
目的 人子宮內膜間質細胞蛻膜化標誌蛋白胰島素樣生長因子結閤蛋白-1 (insulin-like growth factor binding protein-1,IGFBP-1)參與調控月經週期、排卵、蛻膜化、胚胎種植以及胎兒生長等生理過程,本研究旨在探索鋅指蛋白KLF12對人子宮內膜間質細胞體外蛻膜化過程中IGFBP 1錶達的影響.方法 製備Ad Flag KLF12重組腺病毒,通過熒光定量聚閤酶鏈式反應(PCR)和酶聯免疫吸附試驗(ELISA)結閤重組腺病毒介導的KLF12過錶達實驗,闡述人子宮內膜間質細胞體外蛻膜化過程中KLF12對IGFBP 1錶達調控作用.結果 成功穫得滴度為2×1011 ifu/ml的重組KLF12腺病毒,該腺病毒可在人子宮內膜間質細胞中高錶達Flag KLF12融閤蛋白;體外分離培養的人子宮內膜間質細胞經8 Br cAMP和醋痠甲羥孕酮(medroxy progesterone acetate,MPA)聯閤誘導蛻膜化後,KLF12的mRNA錶達隨著誘導時間延長逐漸降低,72 h降低最明顯,較未刺激降低約70％;過錶達KLF12顯著抑製8 Br cAMP和MPA誘導的人子宮內膜間質細胞中IGFBP 1 mRNA的錶達,併以時間依賴的方式明顯抑製IGFBP 1的分泌(P＜0.01);過錶達KLF12明顯抑製人子宮內膜間質細胞體外蛻膜化過程中IGFBP 1啟動子轉錄活性.結論 鋅指蛋白KLF12抑製人子宮內膜間質細胞體外蛻膜化過程中IGFBP 1的錶達與分泌.
목적 인자궁내막간질세포세막화표지단백이도소양생장인자결합단백-1 (insulin-like growth factor binding protein-1,IGFBP-1)삼여조공월경주기、배란、세막화、배태충식이급태인생장등생리과정,본연구지재탐색자지단백KLF12대인자궁내막간질세포체외세막화과정중IGFBP 1표체적영향.방법 제비Ad Flag KLF12중조선병독,통과형광정량취합매련식반응(PCR)화매련면역흡부시험(ELISA)결합중조선병독개도적KLF12과표체실험,천술인자궁내막간질세포체외세막화과정중KLF12대IGFBP 1표체조공작용.결과 성공획득적도위2×1011 ifu/ml적중조KLF12선병독,해선병독가재인자궁내막간질세포중고표체Flag KLF12융합단백;체외분리배양적인자궁내막간질세포경8 Br cAMP화작산갑간잉동(medroxy progesterone acetate,MPA)연합유도세막화후,KLF12적mRNA표체수착유도시간연장축점강저,72 h강저최명현,교미자격강저약70％;과표체KLF12현저억제8 Br cAMP화MPA유도적인자궁내막간질세포중IGFBP 1 mRNA적표체,병이시간의뢰적방식명현억제IGFBP 1적분비(P＜0.01);과표체KLF12명현억제인자궁내막간질세포체외세막화과정중IGFBP 1계동자전록활성.결론 자지단백KLF12억제인자궁내막간질세포체외세막화과정중IGFBP 1적표체여분비.
