热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2014年
5期
882-889
,共8页
李季%黄天带%华玉伟%黄华孙
李季%黃天帶%華玉偉%黃華孫
리계%황천대%화옥위%황화손
多重PCR%橡胶树%转基因胚状体%转基因叶片%分子鉴定
多重PCR%橡膠樹%轉基因胚狀體%轉基因葉片%分子鑒定
다중PCR%상효수%전기인배상체%전기인협편%분자감정
Multiplex PCR%Rubber tree%Transgenic embryos%Transgenic leaves%Molecular identification
为了同时检测橡胶树转基因胚状体和叶片中含有的多个目标基因序列,并排除扩增结果的假阴性,利用正交试验首次建立了橡胶树管家基因(HbActin)、目标基因新霉素磷酸转移酶Ⅱ(NptⅡ)基因和p-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因的多重PCR检测体系.利用2种酶(PCR Mix酶和Taq酶)对18个转基因胚状体和叶片进行单一引物PCR扩增和多重PCR检测.结果表明:多重PCR检测结果与单一PCR结果完全一致,且多重PCR体系带型清晰,无非特异性扩增,更易读取.多重PCR检测系统具有简单、准确并且高效等特点,只需要进行一个反应就可以检测多个目标基因序列,因而在转基因分子鉴定上具有非常重要的应用价值与潜力.
為瞭同時檢測橡膠樹轉基因胚狀體和葉片中含有的多箇目標基因序列,併排除擴增結果的假陰性,利用正交試驗首次建立瞭橡膠樹管傢基因(HbActin)、目標基因新黴素燐痠轉移酶Ⅱ(NptⅡ)基因和p-葡萄糖苷痠酶(GUS)基因的多重PCR檢測體繫.利用2種酶(PCR Mix酶和Taq酶)對18箇轉基因胚狀體和葉片進行單一引物PCR擴增和多重PCR檢測.結果錶明:多重PCR檢測結果與單一PCR結果完全一緻,且多重PCR體繫帶型清晰,無非特異性擴增,更易讀取.多重PCR檢測繫統具有簡單、準確併且高效等特點,隻需要進行一箇反應就可以檢測多箇目標基因序列,因而在轉基因分子鑒定上具有非常重要的應用價值與潛力.
위료동시검측상효수전기인배상체화협편중함유적다개목표기인서렬,병배제확증결과적가음성,이용정교시험수차건립료상효수관가기인(HbActin)、목표기인신매소린산전이매Ⅱ(NptⅡ)기인화p-포도당감산매(GUS)기인적다중PCR검측체계.이용2충매(PCR Mix매화Taq매)대18개전기인배상체화협편진행단일인물PCR확증화다중PCR검측.결과표명:다중PCR검측결과여단일PCR결과완전일치,차다중PCR체계대형청석,무비특이성확증,경역독취.다중PCR검측계통구유간단、준학병차고효등특점,지수요진행일개반응취가이검측다개목표기인서렬,인이재전기인분자감정상구유비상중요적응용개치여잠력.
