食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2013年
5期
191-196
,共6页
陈静%郝伟伟%王春梅%陈惠%吴琦%韩学易
陳靜%郝偉偉%王春梅%陳惠%吳琦%韓學易
진정%학위위%왕춘매%진혜%오기%한학역
米曲霉%β-葡萄糖苷酶%纯化%酶学性质
米麯黴%β-葡萄糖苷酶%純化%酶學性質
미곡매%β-포도당감매%순화%매학성질
经刚果红平板染色法从土样中筛选到3株产纤维素酶的真菌,通过对其β-葡萄糖苷酶活力的测定,选择一株相对活力较高的菌株进行菌种鉴定.在形态鉴定的基础上,通过内转录间隔区(ITS)序列构建系统发育树初步鉴定为米曲霉(Aspergillus oryzae),命名为giF-10.对米曲霉giF-1O进行摇瓶发酵,经硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶层析、DEAE Cellulose 52离子交换层析进行纯化.得到纯化后的β-葡萄糖苷酶,比活力为40.84U/mg,分子质量约90kD;该β-葡萄糖苷酶最适温度为55℃；在30～50℃之间热稳定性好；最适pH值为4.5; pH4.0～6.0稳定性好；金属离子对酶活力具有一定的影响,Mn2+对酶具有较强的激活作用:Fe3+和Cu2+对β-葡萄糖苷酶活力有较强的抑制作用；该酶对水杨素和纤维二糖具有较强的底物特异性；β-葡萄糖苷酶对水杨素的动力学参数:Km为0.676mmol/L；对纤维二糖的动力学参数为:Km为2.906mmol/L.
經剛果紅平闆染色法從土樣中篩選到3株產纖維素酶的真菌,通過對其β-葡萄糖苷酶活力的測定,選擇一株相對活力較高的菌株進行菌種鑒定.在形態鑒定的基礎上,通過內轉錄間隔區(ITS)序列構建繫統髮育樹初步鑒定為米麯黴(Aspergillus oryzae),命名為giF-10.對米麯黴giF-1O進行搖瓶髮酵,經硫痠銨沉澱、Sephadex G-100凝膠層析、DEAE Cellulose 52離子交換層析進行純化.得到純化後的β-葡萄糖苷酶,比活力為40.84U/mg,分子質量約90kD;該β-葡萄糖苷酶最適溫度為55℃；在30～50℃之間熱穩定性好；最適pH值為4.5; pH4.0～6.0穩定性好；金屬離子對酶活力具有一定的影響,Mn2+對酶具有較彊的激活作用:Fe3+和Cu2+對β-葡萄糖苷酶活力有較彊的抑製作用；該酶對水楊素和纖維二糖具有較彊的底物特異性；β-葡萄糖苷酶對水楊素的動力學參數:Km為0.676mmol/L；對纖維二糖的動力學參數為:Km為2.906mmol/L.
경강과홍평판염색법종토양중사선도3주산섬유소매적진균,통과대기β-포도당감매활력적측정,선택일주상대활력교고적균주진행균충감정.재형태감정적기출상,통과내전록간격구(ITS)서렬구건계통발육수초보감정위미곡매(Aspergillus oryzae),명명위giF-10.대미곡매giF-1O진행요병발효,경류산안침정、Sephadex G-100응효층석、DEAE Cellulose 52리자교환층석진행순화.득도순화후적β-포도당감매,비활력위40.84U/mg,분자질량약90kD;해β-포도당감매최괄온도위55℃；재30～50℃지간열은정성호；최괄pH치위4.5; pH4.0～6.0은정성호；금속리자대매활력구유일정적영향,Mn2+대매구유교강적격활작용:Fe3+화Cu2+대β-포도당감매활력유교강적억제작용；해매대수양소화섬유이당구유교강적저물특이성；β-포도당감매대수양소적동역학삼수:Km위0.676mmol/L；대섬유이당적동역학삼수위:Km위2.906mmol/L.
