食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2013年
6期
199-203
,共5页
万婧%周向阳%张晓峰%帅江冰%张静%沈飚%胡兴娟
萬婧%週嚮暘%張曉峰%帥江冰%張靜%瀋飚%鬍興娟
만청%주향양%장효봉%수강빙%장정%침표%호흥연
金黄色葡萄球菌%双重PCR-DHPLC%水产品%检测
金黃色葡萄毬菌%雙重PCR-DHPLC%水產品%檢測
금황색포도구균%쌍중PCR-DHPLC%수산품%검측
根据编码金黄色葡萄球菌肠毒素A的sea基因、编码耐热核酸酶的nuc基因为目的基因,设计两对特异性引物,利用聚合酶链式反应结合变性高效液相色谱技术,建立水产品中金黄色葡萄球菌的双重PCR-DHPLC检测方法.以30株参考菌株进行特异性实验,除所试8株金葡菌出现目的片段和阳性吸收峰外,其余菌株均未检测到目的片段与阳性吸收峰,表明该方法具有良好的特异性.灵敏性实验结果表明,检测灵敏度达到菌液浓度50CFU/mL,比普通的凝胶电泳高一个数量级.利用建立的双重PCR-DHPLC检测方法对240份水产品进行检测,共检出22株金黄色葡萄球菌,检出率为9.2％,其中含有肠毒素基因有8株,占总样本的3.3％,与国标法检出阳性率比较无显著差异,证明该方法具有良好的实用性.实验证明,本研究建立的双重PCR-DHPLC方法不仅可以特异、灵敏、简便快速且高通量的实现对水产品中金葡菌的检测,而且也可通过对肠毒素基因的分析,方便地判断出该菌株致病性的强弱.
根據編碼金黃色葡萄毬菌腸毒素A的sea基因、編碼耐熱覈痠酶的nuc基因為目的基因,設計兩對特異性引物,利用聚閤酶鏈式反應結閤變性高效液相色譜技術,建立水產品中金黃色葡萄毬菌的雙重PCR-DHPLC檢測方法.以30株參攷菌株進行特異性實驗,除所試8株金葡菌齣現目的片段和暘性吸收峰外,其餘菌株均未檢測到目的片段與暘性吸收峰,錶明該方法具有良好的特異性.靈敏性實驗結果錶明,檢測靈敏度達到菌液濃度50CFU/mL,比普通的凝膠電泳高一箇數量級.利用建立的雙重PCR-DHPLC檢測方法對240份水產品進行檢測,共檢齣22株金黃色葡萄毬菌,檢齣率為9.2％,其中含有腸毒素基因有8株,佔總樣本的3.3％,與國標法檢齣暘性率比較無顯著差異,證明該方法具有良好的實用性.實驗證明,本研究建立的雙重PCR-DHPLC方法不僅可以特異、靈敏、簡便快速且高通量的實現對水產品中金葡菌的檢測,而且也可通過對腸毒素基因的分析,方便地判斷齣該菌株緻病性的彊弱.
근거편마금황색포도구균장독소A적sea기인、편마내열핵산매적nuc기인위목적기인,설계량대특이성인물,이용취합매련식반응결합변성고효액상색보기술,건립수산품중금황색포도구균적쌍중PCR-DHPLC검측방법.이30주삼고균주진행특이성실험,제소시8주금포균출현목적편단화양성흡수봉외,기여균주균미검측도목적편단여양성흡수봉,표명해방법구유량호적특이성.령민성실험결과표명,검측령민도체도균액농도50CFU/mL,비보통적응효전영고일개수량급.이용건립적쌍중PCR-DHPLC검측방법대240빈수산품진행검측,공검출22주금황색포도구균,검출솔위9.2％,기중함유장독소기인유8주,점총양본적3.3％,여국표법검출양성솔비교무현저차이,증명해방법구유량호적실용성.실험증명,본연구건립적쌍중PCR-DHPLC방법불부가이특이、령민、간편쾌속차고통량적실현대수산품중금포균적검측,이차야가통과대장독소기인적분석,방편지판단출해균주치병성적강약.
