食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2013年
6期
73-76
,共4页
茶树%叶绿体DNA%PCR-RFLP%优化
茶樹%葉綠體DNA%PCR-RFLP%優化
다수%협록체DNA%PCR-RFLP%우화
通过正交设计对影响茶树聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)反应体系的主要因素进行优化,快速确立适合茶树叶绿体DNA PCR-RFLP分析的扩增体系和酶切体系.结果表明:最佳PCR扩增体系为100ng模板DNA、200μmol/L dNTPs、1.5mmol/L MgC12、50ng叶绿体引物、3U TaqDNA聚合酶、加ddH2O至25μL;最佳酶切体系为6μL扩增产物用量、2U限制性内切酶量、1×限制性内切酶buffer、加ddH2O至15μL,37℃酶切6h.利用优化的反应体系,对30个茶树品种叶绿体DNA进行PCR-RFLP扩增,可获得清晰扩增图谱和多态性酶切图谱.
通過正交設計對影響茶樹聚閤酶鏈反應-限製性片段長度多態性(PCR-RFLP)反應體繫的主要因素進行優化,快速確立適閤茶樹葉綠體DNA PCR-RFLP分析的擴增體繫和酶切體繫.結果錶明:最佳PCR擴增體繫為100ng模闆DNA、200μmol/L dNTPs、1.5mmol/L MgC12、50ng葉綠體引物、3U TaqDNA聚閤酶、加ddH2O至25μL;最佳酶切體繫為6μL擴增產物用量、2U限製性內切酶量、1×限製性內切酶buffer、加ddH2O至15μL,37℃酶切6h.利用優化的反應體繫,對30箇茶樹品種葉綠體DNA進行PCR-RFLP擴增,可穫得清晰擴增圖譜和多態性酶切圖譜.
통과정교설계대영향다수취합매련반응-한제성편단장도다태성(PCR-RFLP)반응체계적주요인소진행우화,쾌속학립괄합다수협록체DNA PCR-RFLP분석적확증체계화매절체계.결과표명:최가PCR확증체계위100ng모판DNA、200μmol/L dNTPs、1.5mmol/L MgC12、50ng협록체인물、3U TaqDNA취합매、가ddH2O지25μL;최가매절체계위6μL확증산물용량、2U한제성내절매량、1×한제성내절매buffer、가ddH2O지15μL,37℃매절6h.이용우화적반응체계,대30개다수품충협록체DNA진행PCR-RFLP확증,가획득청석확증도보화다태성매절도보.
