食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2013年
8期
172-175
,共4页
吴燕涛%刘晓莉%曹悦%王立平
吳燕濤%劉曉莉%曹悅%王立平
오연도%류효리%조열%왕립평
发酵乳%双歧杆菌%实时荧光定量聚合酶链式反应
髮酵乳%雙歧桿菌%實時熒光定量聚閤酶鏈式反應
발효유%쌍기간균%실시형광정량취합매련식반응
对实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术检测发酵乳中双歧杆菌的DNA提取方法、PCR扩增效率、标准曲线绘制进行探讨,通过比较分析碱式提取法、玻璃珠破碎法和酶解法3种提取方法对发酵乳中总DNA提取效率、4种不同参考菌株的PCR扩增效率以及单一菌株标准曲线与混合菌株标准曲线的计数结果,建立实时荧光定量PCR快速测定发酵乳制品中双歧杆菌数量方法.结果表明:酶解法提取发酵乳中总DNA效果最好,OD260/280比值基本接近1.80,且提取的质量浓度含量最高;不同菌株的PCR扩增效率不同,其中参考菌株1.2213的Ct值与其他3菌株的Ct值存在显著性差异;根据单一菌株绘制标准曲线与混合菌株绘制标准曲线计数结果无显著性差异,后者计数结果更客观、准确.采用酶解法获取样品中的菌体细胞,基于混合菌液绘制标准曲线,采用实时荧光定量PCR技术确定发酵乳中双歧杆菌种属数量,可快速、准确地测定发酵乳中双歧杆菌的数量.
對實時熒光定量聚閤酶鏈式反應(PCR)技術檢測髮酵乳中雙歧桿菌的DNA提取方法、PCR擴增效率、標準麯線繪製進行探討,通過比較分析堿式提取法、玻璃珠破碎法和酶解法3種提取方法對髮酵乳中總DNA提取效率、4種不同參攷菌株的PCR擴增效率以及單一菌株標準麯線與混閤菌株標準麯線的計數結果,建立實時熒光定量PCR快速測定髮酵乳製品中雙歧桿菌數量方法.結果錶明:酶解法提取髮酵乳中總DNA效果最好,OD260/280比值基本接近1.80,且提取的質量濃度含量最高;不同菌株的PCR擴增效率不同,其中參攷菌株1.2213的Ct值與其他3菌株的Ct值存在顯著性差異;根據單一菌株繪製標準麯線與混閤菌株繪製標準麯線計數結果無顯著性差異,後者計數結果更客觀、準確.採用酶解法穫取樣品中的菌體細胞,基于混閤菌液繪製標準麯線,採用實時熒光定量PCR技術確定髮酵乳中雙歧桿菌種屬數量,可快速、準確地測定髮酵乳中雙歧桿菌的數量.
대실시형광정량취합매련식반응(PCR)기술검측발효유중쌍기간균적DNA제취방법、PCR확증효솔、표준곡선회제진행탐토,통과비교분석감식제취법、파리주파쇄법화매해법3충제취방법대발효유중총DNA제취효솔、4충불동삼고균주적PCR확증효솔이급단일균주표준곡선여혼합균주표준곡선적계수결과,건립실시형광정량PCR쾌속측정발효유제품중쌍기간균수량방법.결과표명:매해법제취발효유중총DNA효과최호,OD260/280비치기본접근1.80,차제취적질량농도함량최고;불동균주적PCR확증효솔불동,기중삼고균주1.2213적Ct치여기타3균주적Ct치존재현저성차이;근거단일균주회제표준곡선여혼합균주회제표준곡선계수결과무현저성차이,후자계수결과경객관、준학.채용매해법획취양품중적균체세포,기우혼합균액회제표준곡선,채용실시형광정량PCR기술학정발효유중쌍기간균충속수량,가쾌속、준학지측정발효유중쌍기간균적수량.
