食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2013年
15期
166-170
,共5页
高山被孢霉%△5去饱和酶基因%毕赤酵母%花生四烯酸
高山被孢黴%△5去飽和酶基因%畢赤酵母%花生四烯痠
고산피포매%△5거포화매기인%필적효모%화생사희산
Mortierella alpina%Δ5 desaturase gene%Pichia pastoris GS115%arachidonic acid
通过RT-RCR的方法从高山被孢霉W15菌株中扩增到完整的△5去饱和酶基因,其全长为1341bp,编码446个氨基酸.对推导的氨基酸序列进行分析表明,其N末端存在细胞色素b5结构域,在序列中还存在3个保守的组氨酸富集区.将该基因连接到表达载体pPIC3.5K上,转化毕赤酵母细胞,利用G418筛选高拷贝数的转化子.以双高y-亚麻酸为底物,在甲醇诱导的条件下,△5去饱和酶可催化底物脱氢生成花生四烯酸,其含量占总脂肪酸含量的2.85％.说明克隆的△5去饱和酶基因能在毕赤酵母中进行功能性的表达.
通過RT-RCR的方法從高山被孢黴W15菌株中擴增到完整的△5去飽和酶基因,其全長為1341bp,編碼446箇氨基痠.對推導的氨基痠序列進行分析錶明,其N末耑存在細胞色素b5結構域,在序列中還存在3箇保守的組氨痠富集區.將該基因連接到錶達載體pPIC3.5K上,轉化畢赤酵母細胞,利用G418篩選高拷貝數的轉化子.以雙高y-亞痳痠為底物,在甲醇誘導的條件下,△5去飽和酶可催化底物脫氫生成花生四烯痠,其含量佔總脂肪痠含量的2.85％.說明剋隆的△5去飽和酶基因能在畢赤酵母中進行功能性的錶達.
통과RT-RCR적방법종고산피포매W15균주중확증도완정적△5거포화매기인,기전장위1341bp,편마446개안기산.대추도적안기산서렬진행분석표명,기N말단존재세포색소b5결구역,재서렬중환존재3개보수적조안산부집구.장해기인련접도표체재체pPIC3.5K상,전화필적효모세포,이용G418사선고고패수적전화자.이쌍고y-아마산위저물,재갑순유도적조건하,△5거포화매가최화저물탈경생성화생사희산,기함량점총지방산함량적2.85％.설명극륭적△5거포화매기인능재필적효모중진행공능성적표체.
