食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2013年
19期
158-165
,共8页
湛东锐%孟晓露%李连强%曹娜%王惠%刘天行%辛志宏
湛東銳%孟曉露%李連彊%曹娜%王惠%劉天行%辛誌宏
담동예%맹효로%리련강%조나%왕혜%류천행%신지굉
内生真菌%分子鉴定%系统发育分析%抗氧化活性%响应曲面法
內生真菌%分子鑒定%繫統髮育分析%抗氧化活性%響應麯麵法
내생진균%분자감정%계통발육분석%항양화활성%향응곡면법
endophytic fungi%molecular identification%phylogenetic analysis%antioxidant activity%response surface methodology
采用分子生物学与形态学观察相结合的方法,鉴定分离自盐生海芦笋中的内生真菌Salicorn 35.提取基因组DNA后分别对其18S rDNA和ITS1-5.8S-ITS4区域进行PCR扩增并进行单克隆测序分析.将序列提交NCBI进行核酸序列同源性比较,利用MEGA5.0软件对序列进行分析,构建系统发育树.结合形态学与显微镜观察将该菌鉴定为茄病镰刀菌(Fusarium solani).在此基础上,以抗氧化活性为指标,采用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应曲面法对Salicorn 35菌株的发酵条件进行优化,最大限度地提高其抗氧化活性.优化后的最佳培养基配方为(质量分数):酵母膏1.5％、蛋白胨2.7％、土豆40％、麦芽糖3％、甘露醇1％、葡萄糖1.5％、味精1.0％、氯化钠6.0％,pH5；采用此培养基所得发酵产物对DPPH自由基的清除率为76.75％,比优化前(清除率57.77％)有显著提高.
採用分子生物學與形態學觀察相結閤的方法,鑒定分離自鹽生海蘆筍中的內生真菌Salicorn 35.提取基因組DNA後分彆對其18S rDNA和ITS1-5.8S-ITS4區域進行PCR擴增併進行單剋隆測序分析.將序列提交NCBI進行覈痠序列同源性比較,利用MEGA5.0軟件對序列進行分析,構建繫統髮育樹.結閤形態學與顯微鏡觀察將該菌鑒定為茄病鐮刀菌(Fusarium solani).在此基礎上,以抗氧化活性為指標,採用Plackett-Burman試驗、最陡爬坡試驗和響應麯麵法對Salicorn 35菌株的髮酵條件進行優化,最大限度地提高其抗氧化活性.優化後的最佳培養基配方為(質量分數):酵母膏1.5％、蛋白胨2.7％、土豆40％、麥芽糖3％、甘露醇1％、葡萄糖1.5％、味精1.0％、氯化鈉6.0％,pH5；採用此培養基所得髮酵產物對DPPH自由基的清除率為76.75％,比優化前(清除率57.77％)有顯著提高.
채용분자생물학여형태학관찰상결합적방법,감정분리자염생해호순중적내생진균Salicorn 35.제취기인조DNA후분별대기18S rDNA화ITS1-5.8S-ITS4구역진행PCR확증병진행단극륭측서분석.장서렬제교NCBI진행핵산서렬동원성비교,이용MEGA5.0연건대서렬진행분석,구건계통발육수.결합형태학여현미경관찰장해균감정위가병렴도균(Fusarium solani).재차기출상,이항양화활성위지표,채용Plackett-Burman시험、최두파파시험화향응곡면법대Salicorn 35균주적발효조건진행우화,최대한도지제고기항양화활성.우화후적최가배양기배방위(질량분수):효모고1.5％、단백동2.7％、토두40％、맥아당3％、감로순1％、포도당1.5％、미정1.0％、록화납6.0％,pH5；채용차배양기소득발효산물대DPPH자유기적청제솔위76.75％,비우화전(청제솔57.77％)유현저제고.
