食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2013年
18期
263-266
,共4页
许龙岩%袁慕云%曹际娟%凌莉
許龍巖%袁慕雲%曹際娟%凌莉
허룡암%원모운%조제연%릉리
副溶血性弧菌%toxR基因%tdh基因%TaqMan探针%双重荧光聚合酶链式反应%检测%食品
副溶血性弧菌%toxR基因%tdh基因%TaqMan探針%雙重熒光聚閤酶鏈式反應%檢測%食品
부용혈성호균%toxR기인%tdh기인%TaqMan탐침%쌍중형광취합매련식반응%검측%식품
Vibrio parahaemolyticus%toxR gene%tdh gene%TaqMan based probe%duplex fluorescence real-time PCR%detection
目的:建立同时检测副溶血性弧菌(VP)和其毒力基因的方法.方法:根据VP的toxR基因和tdh基因,分别设计引物和探针,建立基于TaqMan探针双重荧光聚合酶链式反应扩增体系,进行特异性、敏感性实验,并用建立的方法检测从广东地区和辽宁地区进出口食品中分离的VP菌株的毒力基因分布情况.结果:VP标准菌株和3株从食物中毒病人中分离株均出现toxR基因和tdh基因扩增曲线,而31株包括溶藻弧菌、单增李斯特菌等弧菌属和肠杆菌科的菌株扩增结果呈阴性;敏感性实验结果表明,VP浓度与Ct值有很好的反向的线性关系,toxR和tdh线性方程的R2分别为0.999、0.997,最低检测浓度达到3.6×102CFU/mL;检测食品中分离的37株VP只出现toxR基因扩增曲线,未见tdh基因扩增曲线,表明37株VP分离株均未带tdh毒力基因.结论:建立的方法特异性好、灵敏度高,可用于食品中VP的特异性及毒力基因检测.
目的:建立同時檢測副溶血性弧菌(VP)和其毒力基因的方法.方法:根據VP的toxR基因和tdh基因,分彆設計引物和探針,建立基于TaqMan探針雙重熒光聚閤酶鏈式反應擴增體繫,進行特異性、敏感性實驗,併用建立的方法檢測從廣東地區和遼寧地區進齣口食品中分離的VP菌株的毒力基因分佈情況.結果:VP標準菌株和3株從食物中毒病人中分離株均齣現toxR基因和tdh基因擴增麯線,而31株包括溶藻弧菌、單增李斯特菌等弧菌屬和腸桿菌科的菌株擴增結果呈陰性;敏感性實驗結果錶明,VP濃度與Ct值有很好的反嚮的線性關繫,toxR和tdh線性方程的R2分彆為0.999、0.997,最低檢測濃度達到3.6×102CFU/mL;檢測食品中分離的37株VP隻齣現toxR基因擴增麯線,未見tdh基因擴增麯線,錶明37株VP分離株均未帶tdh毒力基因.結論:建立的方法特異性好、靈敏度高,可用于食品中VP的特異性及毒力基因檢測.
목적:건립동시검측부용혈성호균(VP)화기독력기인적방법.방법:근거VP적toxR기인화tdh기인,분별설계인물화탐침,건립기우TaqMan탐침쌍중형광취합매련식반응확증체계,진행특이성、민감성실험,병용건립적방법검측종엄동지구화료녕지구진출구식품중분리적VP균주적독력기인분포정황.결과:VP표준균주화3주종식물중독병인중분리주균출현toxR기인화tdh기인확증곡선,이31주포괄용조호균、단증리사특균등호균속화장간균과적균주확증결과정음성;민감성실험결과표명,VP농도여Ct치유흔호적반향적선성관계,toxR화tdh선성방정적R2분별위0.999、0.997,최저검측농도체도3.6×102CFU/mL;검측식품중분리적37주VP지출현toxR기인확증곡선,미견tdh기인확증곡선,표명37주VP분리주균미대tdh독력기인.결론:건립적방법특이성호、령민도고,가용우식품중VP적특이성급독력기인검측.