食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2013年
23期
239-244
,共6页
孙芳%胡瑞斌%任美凤%唐云明
孫芳%鬍瑞斌%任美鳳%唐雲明
손방%호서빈%임미봉%당운명
鸭心%苹果酸脱氢酶%分离纯化%性质
鴨心%蘋果痠脫氫酶%分離純化%性質
압심%평과산탈경매%분리순화%성질
duck heart%malate dehydrogenase (MDH)%isolation and purification%characterization
取新鲜鸭心,通过匀浆、硫酸铵沉淀、有机溶剂沉淀、DEAE-Sepharose层析以及Superdex-200层析等方法纯化,获得鸭心中所含的两种电泳纯的苹果酸脱氢酶同工酶(c-MDH和m-MDH),并对粗酶液中含量较高的c-MDH进行酶学性质研究.结果表明:c-MDH和m-MDH纯化倍数分别为69.07倍和130.40倍,酶活力回收率分别为25.54％和10.98％,亚基分子质量分别为39.58ku和37.62ku.c-MDH酶学性质研究表明:该酶最适反应温度为55℃,在30℃以下时比较稳定;最适反应pH为7.2,在pH6～9范围内稳定性较好;其对草酰乙酸的Km值为140.93μmol/L;草酸、SDS、Cu2+、Ag+对该酶的抑制作用非常强烈,而Mg2+、K+、Ba2+对该酶表现出明显的激活作用.
取新鮮鴨心,通過勻漿、硫痠銨沉澱、有機溶劑沉澱、DEAE-Sepharose層析以及Superdex-200層析等方法純化,穫得鴨心中所含的兩種電泳純的蘋果痠脫氫酶同工酶(c-MDH和m-MDH),併對粗酶液中含量較高的c-MDH進行酶學性質研究.結果錶明:c-MDH和m-MDH純化倍數分彆為69.07倍和130.40倍,酶活力迴收率分彆為25.54％和10.98％,亞基分子質量分彆為39.58ku和37.62ku.c-MDH酶學性質研究錶明:該酶最適反應溫度為55℃,在30℃以下時比較穩定;最適反應pH為7.2,在pH6～9範圍內穩定性較好;其對草酰乙痠的Km值為140.93μmol/L;草痠、SDS、Cu2+、Ag+對該酶的抑製作用非常彊烈,而Mg2+、K+、Ba2+對該酶錶現齣明顯的激活作用.
취신선압심,통과균장、류산안침정、유궤용제침정、DEAE-Sepharose층석이급Superdex-200층석등방법순화,획득압심중소함적량충전영순적평과산탈경매동공매(c-MDH화m-MDH),병대조매액중함량교고적c-MDH진행매학성질연구.결과표명:c-MDH화m-MDH순화배수분별위69.07배화130.40배,매활력회수솔분별위25.54％화10.98％,아기분자질량분별위39.58ku화37.62ku.c-MDH매학성질연구표명:해매최괄반응온도위55℃,재30℃이하시비교은정;최괄반응pH위7.2,재pH6～9범위내은정성교호;기대초선을산적Km치위140.93μmol/L;초산、SDS、Cu2+、Ag+대해매적억제작용비상강렬,이Mg2+、K+、Ba2+대해매표현출명현적격활작용.
