食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2013年
24期
182-187
,共6页
姜侃%吕沁风%汪新%夏琳%张峥%陈小珍
薑侃%呂沁風%汪新%夏琳%張崢%陳小珍
강간%려심풍%왕신%하림%장쟁%진소진
LAMP%沙门氏菌%金黄色葡萄球菌%单增李斯特菌%快速检测
LAMP%沙門氏菌%金黃色葡萄毬菌%單增李斯特菌%快速檢測
LAMP%사문씨균%금황색포도구균%단증리사특균%쾌속검측
loop-mediated isothermal amplification (LAMP)%Salmonella spp.%Staphylococcus aureus%Listeria monocytogenes%rapid detection
为能一步快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌3种食源性致病菌,建立了三重环介导等温扩增(LAMP)检测方法.针对沙门氏菌的侵袭蛋白(invA)基因、金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶(nuc)基因、单增李斯特菌(hly)基因3个高度保守的基因,设计出3套LAMP引物.以8株代表目标菌株,三重LAMP反应体系中Mg2+浓度4.6mmol/L、扩增温度61℃.通过电泳检测、离心观察沉淀和荧光检测证明该方法能够在90min内一次性检出以上3种致病菌.3种菌的检测灵敏度均约为10fg/μL,是PCR检测灵敏度(10pg/μL)的1000倍.以无害李斯特菌等常见的20株非目标菌株为对照,证明了此方法的特异性.LAMP产物DNA测序结果与预期一致,证明了该方法的正确性.该三重LAMP检测方法具有快速、特异、灵敏度高的优点,适用于食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌的快速检测.
為能一步快速檢測沙門氏菌、金黃色葡萄毬菌和單增李斯特菌3種食源性緻病菌,建立瞭三重環介導等溫擴增(LAMP)檢測方法.針對沙門氏菌的侵襲蛋白(invA)基因、金黃色葡萄毬菌的耐熱覈痠酶(nuc)基因、單增李斯特菌(hly)基因3箇高度保守的基因,設計齣3套LAMP引物.以8株代錶目標菌株,三重LAMP反應體繫中Mg2+濃度4.6mmol/L、擴增溫度61℃.通過電泳檢測、離心觀察沉澱和熒光檢測證明該方法能夠在90min內一次性檢齣以上3種緻病菌.3種菌的檢測靈敏度均約為10fg/μL,是PCR檢測靈敏度(10pg/μL)的1000倍.以無害李斯特菌等常見的20株非目標菌株為對照,證明瞭此方法的特異性.LAMP產物DNA測序結果與預期一緻,證明瞭該方法的正確性.該三重LAMP檢測方法具有快速、特異、靈敏度高的優點,適用于食品中沙門氏菌、金黃色葡萄毬菌和單增李斯特菌的快速檢測.
위능일보쾌속검측사문씨균、금황색포도구균화단증리사특균3충식원성치병균,건립료삼중배개도등온확증(LAMP)검측방법.침대사문씨균적침습단백(invA)기인、금황색포도구균적내열핵산매(nuc)기인、단증리사특균(hly)기인3개고도보수적기인,설계출3투LAMP인물.이8주대표목표균주,삼중LAMP반응체계중Mg2+농도4.6mmol/L、확증온도61℃.통과전영검측、리심관찰침정화형광검측증명해방법능구재90min내일차성검출이상3충치병균.3충균적검측령민도균약위10fg/μL,시PCR검측령민도(10pg/μL)적1000배.이무해리사특균등상견적20주비목표균주위대조,증명료차방법적특이성.LAMP산물DNA측서결과여예기일치,증명료해방법적정학성.해삼중LAMP검측방법구유쾌속、특이、령민도고적우점,괄용우식품중사문씨균、금황색포도구균화단증리사특균적쾌속검측.
