现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2014年
2期
26-28,31
,共4页
马丁%何殿殿%李妍%惠宏襄
馬丁%何殿殿%李妍%惠宏襄
마정%하전전%리연%혜굉양
胰高血糖素样肽-1%内皮细胞%高糖%凋亡%活性氧自由基
胰高血糖素樣肽-1%內皮細胞%高糖%凋亡%活性氧自由基
이고혈당소양태-1%내피세포%고당%조망%활성양자유기
glucagon like peptide-1%endothelial cell%high glucose%apoptosis%reactive oxygen species
目的 观察胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对高糖高胰岛素诱导主动脉内皮细胞损伤的保护作用,并揭示其机理.方法 原代培养正常成年SD大鼠胸主动脉内皮细胞,将细胞分为五组,即(A)正常糖(5.5 mmol/L)组,(B)高糖(25 mmol/L)组、(C)高糖±GLP-1(10 nmol/L)组,(D)高糖+高胰岛素(100 nmol/L)组和(E)高糖高胰岛素±GLP-1组.采用DAPI染液检测发生凋亡改变的细胞,各组细胞凋亡率=(凋亡改变的细胞数/总细胞数)×100％;采用比色法检测细胞内caspase-3和SOD1,SOD2的相对酶活性(A实验组/A对照组);采用流式细胞术检测细胞中活性氧自由基(ROS)的相对含量(平均荧光强度),并通过荧光定量PCR对细胞中NADPH氧化酶的亚基p22phox以及SOD1,SOD2和过氧化氢酶的mRNA转录水平进行检测(RQ值).结果 ①B组和C组细胞的凋亡率分别为(36.9±5.90)％和(20.5±3.39)％,两者相比差异具有统计学意义(P=0.035);D组和E组细胞的凋亡率分别为(52±8.14)％和(17.52±0.68)％,两者相比差异具有统计学意义(P=0.017);②caspase-3相对酶活性在B组和C组中分别为1.50±0.07,1.06±0.03,两者相比差异具有统计学意义(P=0.000),在D组和E组中分别为1.77±0.08和1.22±0.07,两者相比差异具有统计学意义(P=0.000);③ROS的相对含量在B组和C组中分别为1.50±0.11,0.52±0.10,两者相比差异具有统计学意义(t=6.844,P=0.000);④B组中SOD2和过氧化氢酶的mRNA转录水平(1.06±0.06,1.04±0.22)均低于C组(1.33±0.10,1.77±0.16),差异具有统计学意义(P=0.002和0.018),D组中SOD2和过氧化氢酶的mRNA转录水平(1.08±0.13,1.02±0.15)均低于E组(1.27±0.06,1.58±0.17),差异具有统计学意义(P=0.022和0.020);B组和D组分别与C组和E组相比,p22phox和SOD1的mRNA转录水平差异不具有统计学意义(P＞0.05);⑤SOD2的相对酶活性在B和C组中分别为0.82±0.02和1.03±0.07,两者相比差异具有统计学意义(P=0.040),在D和E组中分别为0.78±0.06和0.96±0.05,两者相比差异具有统计学意义(P=0.033);SOD1的相对酶活力在各组中的差异不具有统计学意义(F=0.677,P=0.618).结论 GLP-1能降低大鼠主动脉内皮细胞中ROS的含量,抑制细胞凋亡,能有效抑制高糖和高胰岛素对内皮细胞的损伤.
目的 觀察胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)對高糖高胰島素誘導主動脈內皮細胞損傷的保護作用,併揭示其機理.方法 原代培養正常成年SD大鼠胸主動脈內皮細胞,將細胞分為五組,即(A)正常糖(5.5 mmol/L)組,(B)高糖(25 mmol/L)組、(C)高糖±GLP-1(10 nmol/L)組,(D)高糖+高胰島素(100 nmol/L)組和(E)高糖高胰島素±GLP-1組.採用DAPI染液檢測髮生凋亡改變的細胞,各組細胞凋亡率=(凋亡改變的細胞數/總細胞數)×100％;採用比色法檢測細胞內caspase-3和SOD1,SOD2的相對酶活性(A實驗組/A對照組);採用流式細胞術檢測細胞中活性氧自由基(ROS)的相對含量(平均熒光彊度),併通過熒光定量PCR對細胞中NADPH氧化酶的亞基p22phox以及SOD1,SOD2和過氧化氫酶的mRNA轉錄水平進行檢測(RQ值).結果 ①B組和C組細胞的凋亡率分彆為(36.9±5.90)％和(20.5±3.39)％,兩者相比差異具有統計學意義(P=0.035);D組和E組細胞的凋亡率分彆為(52±8.14)％和(17.52±0.68)％,兩者相比差異具有統計學意義(P=0.017);②caspase-3相對酶活性在B組和C組中分彆為1.50±0.07,1.06±0.03,兩者相比差異具有統計學意義(P=0.000),在D組和E組中分彆為1.77±0.08和1.22±0.07,兩者相比差異具有統計學意義(P=0.000);③ROS的相對含量在B組和C組中分彆為1.50±0.11,0.52±0.10,兩者相比差異具有統計學意義(t=6.844,P=0.000);④B組中SOD2和過氧化氫酶的mRNA轉錄水平(1.06±0.06,1.04±0.22)均低于C組(1.33±0.10,1.77±0.16),差異具有統計學意義(P=0.002和0.018),D組中SOD2和過氧化氫酶的mRNA轉錄水平(1.08±0.13,1.02±0.15)均低于E組(1.27±0.06,1.58±0.17),差異具有統計學意義(P=0.022和0.020);B組和D組分彆與C組和E組相比,p22phox和SOD1的mRNA轉錄水平差異不具有統計學意義(P＞0.05);⑤SOD2的相對酶活性在B和C組中分彆為0.82±0.02和1.03±0.07,兩者相比差異具有統計學意義(P=0.040),在D和E組中分彆為0.78±0.06和0.96±0.05,兩者相比差異具有統計學意義(P=0.033);SOD1的相對酶活力在各組中的差異不具有統計學意義(F=0.677,P=0.618).結論 GLP-1能降低大鼠主動脈內皮細胞中ROS的含量,抑製細胞凋亡,能有效抑製高糖和高胰島素對內皮細胞的損傷.
목적 관찰이고혈당소양태-1(GLP-1)대고당고이도소유도주동맥내피세포손상적보호작용,병게시기궤리.방법 원대배양정상성년SD대서흉주동맥내피세포,장세포분위오조,즉(A)정상당(5.5 mmol/L)조,(B)고당(25 mmol/L)조、(C)고당±GLP-1(10 nmol/L)조,(D)고당+고이도소(100 nmol/L)조화(E)고당고이도소±GLP-1조.채용DAPI염액검측발생조망개변적세포,각조세포조망솔=(조망개변적세포수/총세포수)×100％;채용비색법검측세포내caspase-3화SOD1,SOD2적상대매활성(A실험조/A대조조);채용류식세포술검측세포중활성양자유기(ROS)적상대함량(평균형광강도),병통과형광정량PCR대세포중NADPH양화매적아기p22phox이급SOD1,SOD2화과양화경매적mRNA전록수평진행검측(RQ치).결과 ①B조화C조세포적조망솔분별위(36.9±5.90)％화(20.5±3.39)％,량자상비차이구유통계학의의(P=0.035);D조화E조세포적조망솔분별위(52±8.14)％화(17.52±0.68)％,량자상비차이구유통계학의의(P=0.017);②caspase-3상대매활성재B조화C조중분별위1.50±0.07,1.06±0.03,량자상비차이구유통계학의의(P=0.000),재D조화E조중분별위1.77±0.08화1.22±0.07,량자상비차이구유통계학의의(P=0.000);③ROS적상대함량재B조화C조중분별위1.50±0.11,0.52±0.10,량자상비차이구유통계학의의(t=6.844,P=0.000);④B조중SOD2화과양화경매적mRNA전록수평(1.06±0.06,1.04±0.22)균저우C조(1.33±0.10,1.77±0.16),차이구유통계학의의(P=0.002화0.018),D조중SOD2화과양화경매적mRNA전록수평(1.08±0.13,1.02±0.15)균저우E조(1.27±0.06,1.58±0.17),차이구유통계학의의(P=0.022화0.020);B조화D조분별여C조화E조상비,p22phox화SOD1적mRNA전록수평차이불구유통계학의의(P＞0.05);⑤SOD2적상대매활성재B화C조중분별위0.82±0.02화1.03±0.07,량자상비차이구유통계학의의(P=0.040),재D화E조중분별위0.78±0.06화0.96±0.05,량자상비차이구유통계학의의(P=0.033);SOD1적상대매활력재각조중적차이불구유통계학의의(F=0.677,P=0.618).결론 GLP-1능강저대서주동맥내피세포중ROS적함량,억제세포조망,능유효억제고당화고이도소대내피세포적손상.
