河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
3期
116-120
,共5页
王其海%王裔娜%刘晓华%吴文江%丁宁%牛洪斌%王林忠%吴国良
王其海%王裔娜%劉曉華%吳文江%丁寧%牛洪斌%王林忠%吳國良
왕기해%왕예나%류효화%오문강%정저%우홍빈%왕림충%오국량
桃叶片%RNA提取%Trizol法%改良CTAB法%改良SDS-苯酚法
桃葉片%RNA提取%Trizol法%改良CTAB法%改良SDS-苯酚法
도협편%RNA제취%Trizol법%개량CTAB법%개량SDS-분분법
peach leaves%RNA extraction%Trizol method%improved CTAB method%improved SDS-phenol method
为了从桃叶片中提取到高质量的RNA,以进行反转录、RT-PCR等后续分子生物学试验,选取了改良硼砂-CTAB法、改良CTAB法、改良SDS-苯酚法、试剂盒法、Trizol法,以及在试验中探索的改良Trizol法Ⅰ和改良Trizol法Ⅱ对桃不同发育时期的叶片总RNA进行提取,测定RNA样品的OD值,结合琼脂糖凝胶电泳检测总RNA样品的质量.结果表明,这些方法虽然都能获得桃叶片总RNA,但是或存在不同程度的DNA残留,或有蛋白、多糖等杂质污染,或降解严重;而改良的Trizol法提取总RNA的完整性和纯度较好;针对生长期和衰老期叶片的不同生理特性可分别采用改良Trizol法Ⅰ和改良Trizol法Ⅱ,提取的总RNA反转录后,通过RT-PCR检测,条带明亮清晰,与预期目的基因片段大小一致,说明这2种方法提取的总RNA能用于后期的分子生物学试验.
為瞭從桃葉片中提取到高質量的RNA,以進行反轉錄、RT-PCR等後續分子生物學試驗,選取瞭改良硼砂-CTAB法、改良CTAB法、改良SDS-苯酚法、試劑盒法、Trizol法,以及在試驗中探索的改良Trizol法Ⅰ和改良Trizol法Ⅱ對桃不同髮育時期的葉片總RNA進行提取,測定RNA樣品的OD值,結閤瓊脂糖凝膠電泳檢測總RNA樣品的質量.結果錶明,這些方法雖然都能穫得桃葉片總RNA,但是或存在不同程度的DNA殘留,或有蛋白、多糖等雜質汙染,或降解嚴重;而改良的Trizol法提取總RNA的完整性和純度較好;針對生長期和衰老期葉片的不同生理特性可分彆採用改良Trizol法Ⅰ和改良Trizol法Ⅱ,提取的總RNA反轉錄後,通過RT-PCR檢測,條帶明亮清晰,與預期目的基因片段大小一緻,說明這2種方法提取的總RNA能用于後期的分子生物學試驗.
위료종도협편중제취도고질량적RNA,이진행반전록、RT-PCR등후속분자생물학시험,선취료개량붕사-CTAB법、개량CTAB법、개량SDS-분분법、시제합법、Trizol법,이급재시험중탐색적개량Trizol법Ⅰ화개량Trizol법Ⅱ대도불동발육시기적협편총RNA진행제취,측정RNA양품적OD치,결합경지당응효전영검측총RNA양품적질량.결과표명,저사방법수연도능획득도협편총RNA,단시혹존재불동정도적DNA잔류,혹유단백、다당등잡질오염,혹강해엄중;이개량적Trizol법제취총RNA적완정성화순도교호;침대생장기화쇠로기협편적불동생리특성가분별채용개량Trizol법Ⅰ화개량Trizol법Ⅱ,제취적총RNA반전록후,통과RT-PCR검측,조대명량청석,여예기목적기인편단대소일치,설명저2충방법제취적총RNA능용우후기적분자생물학시험.
