南方农业学报
南方農業學報
남방농업학보
GUANGXI AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
4期
546-550
,共5页
岑华飞%黄玉新%罗霆%周珊%高轶静%段维兴%杨翠芳%周会%张革民
岑華飛%黃玉新%囉霆%週珊%高軼靜%段維興%楊翠芳%週會%張革民
잠화비%황옥신%라정%주산%고질정%단유흥%양취방%주회%장혁민
甘蔗%叶绿体DNA%提取%trnL基因%改良的DNase Ⅰ差速离心法
甘蔗%葉綠體DNA%提取%trnL基因%改良的DNase Ⅰ差速離心法
감자%협록체DNA%제취%trnL기인%개량적DNase Ⅰ차속리심법
sugarcane%cpDNA%extraction%trnL gene%modified DNase Ⅰ differential centrifugation method
[目的]探索适于普通实验室条件的甘蔗叶绿体DNA(cpDNA)提取方法,为甘蔗叶绿体分子生物学研究提供参考.[方法]参考水稻、小麦等作物cpDNA的DNase Ⅰ差速离心处理法,采用改良的DNase Ⅰ差速离心法提纯甘蔗cpDNA,并对其trnL基因序列进行比对分析,证实所提取cpDNA的可行性.[结果]采用改良的DNase Ⅰ差速离心处理法提取能得到量多、杂质少的cpDNA,用Eppendorf蛋白核酸测定仪检测,平均每克甘蔗样可提取2.71 μg cpDNA,OD260/OD280为1.79～1.90.对提取的cpDNA的trnL基因序列进行比对分析,证实参试的甘蔗栽培种、斑割复合体后代及其回交材料的叶绿体trnL基因与已报道的甘蔗栽培种NCo 310、SP-80-3280和割手密HN0046的trnL基因相似度均在99.0％以上,并在381、386、389、392、393、400、488、490 bp等8个位点上检测出碱基突变、插入和缺失现象.[结论]采用改良的DNase Ⅰ差速离心处理法提取甘蔗叶绿体DNA具有可行性,提取的甘蔗cpDNA完全可以用于后续的分子水平研究.
[目的]探索適于普通實驗室條件的甘蔗葉綠體DNA(cpDNA)提取方法,為甘蔗葉綠體分子生物學研究提供參攷.[方法]參攷水稻、小麥等作物cpDNA的DNase Ⅰ差速離心處理法,採用改良的DNase Ⅰ差速離心法提純甘蔗cpDNA,併對其trnL基因序列進行比對分析,證實所提取cpDNA的可行性.[結果]採用改良的DNase Ⅰ差速離心處理法提取能得到量多、雜質少的cpDNA,用Eppendorf蛋白覈痠測定儀檢測,平均每剋甘蔗樣可提取2.71 μg cpDNA,OD260/OD280為1.79～1.90.對提取的cpDNA的trnL基因序列進行比對分析,證實參試的甘蔗栽培種、斑割複閤體後代及其迴交材料的葉綠體trnL基因與已報道的甘蔗栽培種NCo 310、SP-80-3280和割手密HN0046的trnL基因相似度均在99.0％以上,併在381、386、389、392、393、400、488、490 bp等8箇位點上檢測齣堿基突變、插入和缺失現象.[結論]採用改良的DNase Ⅰ差速離心處理法提取甘蔗葉綠體DNA具有可行性,提取的甘蔗cpDNA完全可以用于後續的分子水平研究.
[목적]탐색괄우보통실험실조건적감자협록체DNA(cpDNA)제취방법,위감자협록체분자생물학연구제공삼고.[방법]삼고수도、소맥등작물cpDNA적DNase Ⅰ차속리심처리법,채용개량적DNase Ⅰ차속리심법제순감자cpDNA,병대기trnL기인서렬진행비대분석,증실소제취cpDNA적가행성.[결과]채용개량적DNase Ⅰ차속리심처리법제취능득도량다、잡질소적cpDNA,용Eppendorf단백핵산측정의검측,평균매극감자양가제취2.71 μg cpDNA,OD260/OD280위1.79～1.90.대제취적cpDNA적trnL기인서렬진행비대분석,증실삼시적감자재배충、반할복합체후대급기회교재료적협록체trnL기인여이보도적감자재배충NCo 310、SP-80-3280화할수밀HN0046적trnL기인상사도균재99.0％이상,병재381、386、389、392、393、400、488、490 bp등8개위점상검측출감기돌변、삽입화결실현상.[결론]채용개량적DNase Ⅰ차속리심처리법제취감자협록체DNA구유가행성,제취적감자cpDNA완전가이용우후속적분자수평연구.
