遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2013年
4期
502-510
,共9页
孙婷%谢翔%张剑卿%包静%汤川政%雷道希%邱菊辉%王贵学
孫婷%謝翔%張劍卿%包靜%湯川政%雷道希%邱菊輝%王貴學
손정%사상%장검경%포정%탕천정%뢰도희%구국휘%왕귀학
斑马鱼%水平回转培养%血管发育
斑馬魚%水平迴轉培養%血管髮育
반마어%수평회전배양%혈관발육
随着空间生命科学的发展,微重力对生命体的影响已成为科学家们日益关注的问题.多数研究表明,微重力对生物体胚胎早期发育有着重要影响,而血管系统作为胚胎最早行使功能的系统备受关注.目前关于微重力对血管发育影响的研究大多来自对离体培养细胞的体外回转模拟实验,在体实验相对较少.文章利用斑马鱼作为模式动物,在体探究水平回转培养环境下斑马鱼胚胎早期发育及水平回转培养对其血管系统发育的影响.在斑马鱼受精后24 h(24 hpf)时进行水平回转培养处理,至36 hpf 时收集胚胎,通过体视显微镜观察斑马鱼表型变化,通过半定量RT-PCR、qPCR 及全胚原位杂交等手段对比水平回转培养环境下与对照组血管相关因子的表达情况,并通过BrdU 掺入及TUNEL 法进行斑马鱼全胚细胞凋亡及增殖检测.结果表明,在90 r/min 水平回转培养环境下,斑马鱼死亡数量没有差异,24 hpf 时破壳数量显著降低(10.3±0.41 vs.0.0,P<0.05),心率显著加快(223.5±2.32 vs.185.0±3.23,P<0.05),黑色素明显增加,动静脉发育紊乱,且在120 r/min 转速下,胚胎血管特异性表达因子flk1、flt4 及 ephrinB2 的表达均显著降低,斑马鱼细胞凋亡明显增加,而细胞增殖无显著差异,提示水平回转培养对斑马鱼胚胎发育特别是早期血管发育具有重要影响.
隨著空間生命科學的髮展,微重力對生命體的影響已成為科學傢們日益關註的問題.多數研究錶明,微重力對生物體胚胎早期髮育有著重要影響,而血管繫統作為胚胎最早行使功能的繫統備受關註.目前關于微重力對血管髮育影響的研究大多來自對離體培養細胞的體外迴轉模擬實驗,在體實驗相對較少.文章利用斑馬魚作為模式動物,在體探究水平迴轉培養環境下斑馬魚胚胎早期髮育及水平迴轉培養對其血管繫統髮育的影響.在斑馬魚受精後24 h(24 hpf)時進行水平迴轉培養處理,至36 hpf 時收集胚胎,通過體視顯微鏡觀察斑馬魚錶型變化,通過半定量RT-PCR、qPCR 及全胚原位雜交等手段對比水平迴轉培養環境下與對照組血管相關因子的錶達情況,併通過BrdU 摻入及TUNEL 法進行斑馬魚全胚細胞凋亡及增殖檢測.結果錶明,在90 r/min 水平迴轉培養環境下,斑馬魚死亡數量沒有差異,24 hpf 時破殼數量顯著降低(10.3±0.41 vs.0.0,P<0.05),心率顯著加快(223.5±2.32 vs.185.0±3.23,P<0.05),黑色素明顯增加,動靜脈髮育紊亂,且在120 r/min 轉速下,胚胎血管特異性錶達因子flk1、flt4 及 ephrinB2 的錶達均顯著降低,斑馬魚細胞凋亡明顯增加,而細胞增殖無顯著差異,提示水平迴轉培養對斑馬魚胚胎髮育特彆是早期血管髮育具有重要影響.
수착공간생명과학적발전,미중력대생명체적영향이성위과학가문일익관주적문제.다수연구표명,미중력대생물체배태조기발육유착중요영향,이혈관계통작위배태최조행사공능적계통비수관주.목전관우미중력대혈관발육영향적연구대다래자대리체배양세포적체외회전모의실험,재체실험상대교소.문장이용반마어작위모식동물,재체탐구수평회전배양배경하반마어배태조기발육급수평회전배양대기혈관계통발육적영향.재반마어수정후24 h(24 hpf)시진행수평회전배양처리,지36 hpf 시수집배태,통과체시현미경관찰반마어표형변화,통과반정량RT-PCR、qPCR 급전배원위잡교등수단대비수평회전배양배경하여대조조혈관상관인자적표체정황,병통과BrdU 참입급TUNEL 법진행반마어전배세포조망급증식검측.결과표명,재90 r/min 수평회전배양배경하,반마어사망수량몰유차이,24 hpf 시파각수량현저강저(10.3±0.41 vs.0.0,P<0.05),심솔현저가쾌(223.5±2.32 vs.185.0±3.23,P<0.05),흑색소명현증가,동정맥발육문란,차재120 r/min 전속하,배태혈관특이성표체인자flk1、flt4 급 ephrinB2 적표체균현저강저,반마어세포조망명현증가,이세포증식무현저차이,제시수평회전배양대반마어배태발육특별시조기혈관발육구유중요영향.