广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
22期
3397-3399
,共3页
卞铁荣%陈枫%邢宏运%唐利
卞鐵榮%陳楓%邢宏運%唐利
변철영%진풍%형굉운%당리
骨髓间充质干细胞%细胞表型%流式细胞术%免疫组化
骨髓間充質榦細胞%細胞錶型%流式細胞術%免疫組化
골수간충질간세포%세포표형%류식세포술%면역조화
目的 探讨随着传代次数的增加,原代贴壁培养的SD大鼠的骨髓间充质干细胞(MSCs)与其乳鼠MSCs株细胞表型的差异.方法 采用密度梯度离心法和贴壁法分离培养SD大鼠MSCs,对分离培养的SD大鼠的MSCs及其乳鼠MSCs株进行传代,倒置相差显微镜比较两种细胞的形态,借助流式细胞技术及免疫组化技术分析两种细胞表型因子的表达差异.结果 流式细胞技术鉴定SD大鼠原代培养的第7代MSCs与其乳鼠MSCs株的CD71、CD44、CD90、CD45的阳性表达是一致的,两种细胞对应的阳性率分别为77%、68.8%、52.3%、0.05%和97.7%、99.7%、87.6%、0.05%;免疫组化分析其CD44、CD71及阴性对照,两种细胞结果亦吻合,而且CD44和CD71与流式细胞检测结果一致,两种细胞均为阳性表达.结论 流式细胞术及免疫组化鉴定原代贴壁培养的第7代SD大鼠的MSCs与乳鼠MSCs株细胞表型一致,支持原代贴壁培养SD大鼠的MSCs 3~5代已纯化,可用作转染等科研实验.也已证明传至第6、7代,培养的半数以上的MSCs仍保持干细胞的特征,且与细胞株细胞的增殖能力相当.
目的 探討隨著傳代次數的增加,原代貼壁培養的SD大鼠的骨髓間充質榦細胞(MSCs)與其乳鼠MSCs株細胞錶型的差異.方法 採用密度梯度離心法和貼壁法分離培養SD大鼠MSCs,對分離培養的SD大鼠的MSCs及其乳鼠MSCs株進行傳代,倒置相差顯微鏡比較兩種細胞的形態,藉助流式細胞技術及免疫組化技術分析兩種細胞錶型因子的錶達差異.結果 流式細胞技術鑒定SD大鼠原代培養的第7代MSCs與其乳鼠MSCs株的CD71、CD44、CD90、CD45的暘性錶達是一緻的,兩種細胞對應的暘性率分彆為77%、68.8%、52.3%、0.05%和97.7%、99.7%、87.6%、0.05%;免疫組化分析其CD44、CD71及陰性對照,兩種細胞結果亦吻閤,而且CD44和CD71與流式細胞檢測結果一緻,兩種細胞均為暘性錶達.結論 流式細胞術及免疫組化鑒定原代貼壁培養的第7代SD大鼠的MSCs與乳鼠MSCs株細胞錶型一緻,支持原代貼壁培養SD大鼠的MSCs 3~5代已純化,可用作轉染等科研實驗.也已證明傳至第6、7代,培養的半數以上的MSCs仍保持榦細胞的特徵,且與細胞株細胞的增殖能力相噹.
목적 탐토수착전대차수적증가,원대첩벽배양적SD대서적골수간충질간세포(MSCs)여기유서MSCs주세포표형적차이.방법 채용밀도제도리심법화첩벽법분리배양SD대서MSCs,대분리배양적SD대서적MSCs급기유서MSCs주진행전대,도치상차현미경비교량충세포적형태,차조류식세포기술급면역조화기술분석량충세포표형인자적표체차이.결과 류식세포기술감정SD대서원대배양적제7대MSCs여기유서MSCs주적CD71、CD44、CD90、CD45적양성표체시일치적,량충세포대응적양성솔분별위77%、68.8%、52.3%、0.05%화97.7%、99.7%、87.6%、0.05%;면역조화분석기CD44、CD71급음성대조,량충세포결과역문합,이차CD44화CD71여류식세포검측결과일치,량충세포균위양성표체.결론 류식세포술급면역조화감정원대첩벽배양적제7대SD대서적MSCs여유서MSCs주세포표형일치,지지원대첩벽배양SD대서적MSCs 3~5대이순화,가용작전염등과연실험.야이증명전지제6、7대,배양적반수이상적MSCs잉보지간세포적특정,차여세포주세포적증식능력상당.
