河北科技大学学报
河北科技大學學報
하북과기대학학보
JOURNAL OF THE HEBEI UNIVERSITY OF SCIENCE AND ECHNOLOGY
2014年
2期
149-153
,共5页
杜朝%玉蕾叶%孙国杰%王英泽
杜朝%玉蕾葉%孫國傑%王英澤
두조%옥뢰협%손국걸%왕영택
表达载体%标签%MyoD
錶達載體%標籤%MyoD
표체재체%표첨%MyoD
expression vector%tag%MyoD
为了便于检测和纯化转染到非肌肉细胞的生肌因子MyoD,同时为能够与转染的其他生肌因子的表达量进行比较,将MyoD编码区克隆在真核表达载体pcDNA3.1(+)-HA-His.测序表明克隆的MyoD序列正确,并与标签序列构成一个开放阅读框;Western blot显示在起始密码子前添加kozak序列GCCGCCACC,可使融合蛋白能够以较高水平表达;生肌转化实验表明,融合蛋白MyoD-HA能够有效激活靶基因的表达.
為瞭便于檢測和純化轉染到非肌肉細胞的生肌因子MyoD,同時為能夠與轉染的其他生肌因子的錶達量進行比較,將MyoD編碼區剋隆在真覈錶達載體pcDNA3.1(+)-HA-His.測序錶明剋隆的MyoD序列正確,併與標籤序列構成一箇開放閱讀框;Western blot顯示在起始密碼子前添加kozak序列GCCGCCACC,可使融閤蛋白能夠以較高水平錶達;生肌轉化實驗錶明,融閤蛋白MyoD-HA能夠有效激活靶基因的錶達.
위료편우검측화순화전염도비기육세포적생기인자MyoD,동시위능구여전염적기타생기인자적표체량진행비교,장MyoD편마구극륭재진핵표체재체pcDNA3.1(+)-HA-His.측서표명극륭적MyoD서렬정학,병여표첨서렬구성일개개방열독광;Western blot현시재기시밀마자전첨가kozak서렬GCCGCCACC,가사융합단백능구이교고수평표체;생기전화실험표명,융합단백MyoD-HA능구유효격활파기인적표체.
